extraccion de enzimas actividad ezimatica
Páginas: 13 (3228 palabras)
Publicado: 21 de abril de 2015
UNIVERSIDAD
NACIONAL DEL CALLAO
Facultad de Ingeniería Pesquera y de Alimentos
Escuela Profesional de Ingeniería de Alimentos
“EXTRACCION DE ENZIMAS-ACTIVIDAD ENZIMATICA”
Curso:Análisis de Alimentos II
Profesor: Ing. Carlos Chinchay Barragán
Grupo: 90 G
Integrantes:
Barba Gutiérrez, Brenda
Carrión Jaimes, Milagros
Guerrero Paredes, Karina
Monge Echevarría,Brenda
Pastrana Blanco, Eduardo
Rojas Alcalá, Adriana
Tinco Taboada, Sandra
2015-V
I. INTRODUCCIÓN
Las proteasas son enzimas proteolíticas que cumplen una importante función en el desarrollo de las reacciones inherentes al metabolismo de la planta y existen varios estudios desarrollados que demuestran que las proteasas, desempeñan un rol muy importante en la patofisiologia de muchasenfermedades. Se ha despertado interés en su estudio, tanto en lo concerniente a su actividad enzimática, su efecto sobre distintos sustratos y también en lo relacionado a sus inhibidores. Las proteasas constituyen una muy larga y compleja agrupación de enzimas usadas para transformar proteínas simples péptidos.
La piña contiene diversas enzimas entre las que destacan las proteasas, sobresaliendo labromelina que es una glicoproteína básica del grupo de las cistein proteasas. Es una proteína constituida por aminoácidos que se encuentran enrollados en dos partes separadas por un puente que tiene un lugar activo con tiol (SH) libre, la misma que ha reportado varios usos.
El desarrollo de este proyecto consiste en extraer y concentrar bromelina a partir de pulpa de piña (Ananacomosus). Plantacuya actividad enzimática mostró buenos resultados sobre los sustratos de la hidrolisis seleccionados.
.
II. OBJETIVOS
Extraer la bromelina de nuestra muestra (piña) con la ayuda del etanol al 96%. Esta será usado para el ensayo de actividad enzimática de la leche.
Determinar la viscosidad de la leche con el viscosímetro de oswald.
Determinar la densidad de la leche usando ellactodensímetro
III. MARCO TEÓRICO
PURIFICACIÓN Y AISLAMIENTO DE ENZIMAS
Sin perjuicio que un preparado enzimático puede consistir en el mismo extracto o caldo fermentado que sólo se somete a una clarificación y concentración (preparado líquido) o desecación (preparado sólido) se recurre también a métodos de aislamiento y purificación de enzimas en gran escala, lo cual se logra principalmente por lossiguientes procesos:
Adsorción selectiva con hidróxidos de hierro o aluminio coloidales, a cierto pH, pues no todas las proteínas son adsorbidas en iguales condiciones. Una vez adsorbida se lava con agua o solución salina y luego sé eluye a pH diferente, generalmente alcalino mediante otra solución salina, por ejemplo, de fosfato.
Por precipitación: En que las enzimas son fraccionadas al reducirse susolubilidad hasta el punto en que precipitan. Esto se logra por adición de sales a cierto pH y a elevada concentración iónica o por solventes orgánicos (alcohol, acetona, isopropanol) a baja temperatura. La sal más usada es el sulfato de amonio por su alta solubilidad, bajo costo, alta toxicidad para la enzima y por no afectar mayormente la viscosidad de la solución.
Diálisis: Por gradientes deconcentración a través de membranas semipermeables.
Ultrafiltración: Por aspiración o presión a través de membranas de porosidad fina como tamiz molecular. Presenta una alternativa interesante para separar enzimas, pues no hay cambio de fases, ni altos gradientes de temperatura.
Electroforesis: Sobre soportes de papel, gel de almidón, agar o dextrano.
Fraccionamiento cromatográfico: Pico de tipopreparativo, tanto en cada fina, como en columna con intercambiadores iónicos, geles o tamices moleculares.
Combinando estos procedimientos con otros a base de electroforesis de alta tensión, cataforesis y electrodiálisis se logran actualmente separaciones de mezclas complejas de enzimas.
El control de todas estas etapas en su forma más rigurosa, es necesario para asegurar el máximo de rendimiento y...
UNIVERSIDAD
NACIONAL DEL CALLAO
Facultad de Ingeniería Pesquera y de Alimentos
Escuela Profesional de Ingeniería de Alimentos
“EXTRACCION DE ENZIMAS-ACTIVIDAD ENZIMATICA”
Curso:Análisis de Alimentos II
Profesor: Ing. Carlos Chinchay Barragán
Grupo: 90 G
Integrantes:
Barba Gutiérrez, Brenda
Carrión Jaimes, Milagros
Guerrero Paredes, Karina
Monge Echevarría,Brenda
Pastrana Blanco, Eduardo
Rojas Alcalá, Adriana
Tinco Taboada, Sandra
2015-V
I. INTRODUCCIÓN
Las proteasas son enzimas proteolíticas que cumplen una importante función en el desarrollo de las reacciones inherentes al metabolismo de la planta y existen varios estudios desarrollados que demuestran que las proteasas, desempeñan un rol muy importante en la patofisiologia de muchasenfermedades. Se ha despertado interés en su estudio, tanto en lo concerniente a su actividad enzimática, su efecto sobre distintos sustratos y también en lo relacionado a sus inhibidores. Las proteasas constituyen una muy larga y compleja agrupación de enzimas usadas para transformar proteínas simples péptidos.
La piña contiene diversas enzimas entre las que destacan las proteasas, sobresaliendo labromelina que es una glicoproteína básica del grupo de las cistein proteasas. Es una proteína constituida por aminoácidos que se encuentran enrollados en dos partes separadas por un puente que tiene un lugar activo con tiol (SH) libre, la misma que ha reportado varios usos.
El desarrollo de este proyecto consiste en extraer y concentrar bromelina a partir de pulpa de piña (Ananacomosus). Plantacuya actividad enzimática mostró buenos resultados sobre los sustratos de la hidrolisis seleccionados.
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II. OBJETIVOS
Extraer la bromelina de nuestra muestra (piña) con la ayuda del etanol al 96%. Esta será usado para el ensayo de actividad enzimática de la leche.
Determinar la viscosidad de la leche con el viscosímetro de oswald.
Determinar la densidad de la leche usando ellactodensímetro
III. MARCO TEÓRICO
PURIFICACIÓN Y AISLAMIENTO DE ENZIMAS
Sin perjuicio que un preparado enzimático puede consistir en el mismo extracto o caldo fermentado que sólo se somete a una clarificación y concentración (preparado líquido) o desecación (preparado sólido) se recurre también a métodos de aislamiento y purificación de enzimas en gran escala, lo cual se logra principalmente por lossiguientes procesos:
Adsorción selectiva con hidróxidos de hierro o aluminio coloidales, a cierto pH, pues no todas las proteínas son adsorbidas en iguales condiciones. Una vez adsorbida se lava con agua o solución salina y luego sé eluye a pH diferente, generalmente alcalino mediante otra solución salina, por ejemplo, de fosfato.
Por precipitación: En que las enzimas son fraccionadas al reducirse susolubilidad hasta el punto en que precipitan. Esto se logra por adición de sales a cierto pH y a elevada concentración iónica o por solventes orgánicos (alcohol, acetona, isopropanol) a baja temperatura. La sal más usada es el sulfato de amonio por su alta solubilidad, bajo costo, alta toxicidad para la enzima y por no afectar mayormente la viscosidad de la solución.
Diálisis: Por gradientes deconcentración a través de membranas semipermeables.
Ultrafiltración: Por aspiración o presión a través de membranas de porosidad fina como tamiz molecular. Presenta una alternativa interesante para separar enzimas, pues no hay cambio de fases, ni altos gradientes de temperatura.
Electroforesis: Sobre soportes de papel, gel de almidón, agar o dextrano.
Fraccionamiento cromatográfico: Pico de tipopreparativo, tanto en cada fina, como en columna con intercambiadores iónicos, geles o tamices moleculares.
Combinando estos procedimientos con otros a base de electroforesis de alta tensión, cataforesis y electrodiálisis se logran actualmente separaciones de mezclas complejas de enzimas.
El control de todas estas etapas en su forma más rigurosa, es necesario para asegurar el máximo de rendimiento y...
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