Flora bacteriana

Universidad Arturo Prat
Departamento de Agricultura del Desierto y Biotecnología
Ingeniería en Biotecnología

FLORA BACTERIANA

NOMBRES:
Diego Herrera
Alvaro Pimentel
PROFESOR: Edgardo Santander
ASIGNATURA:
Microbiología
FECHA:
Martes 26 de abril del 2011

Iquique – Chile
2011

INTRODUCCIÓN

Nuestro cuerpo está lleno de bacterias que se alojan desde que nacemos.Estas bacterias no son nocivas y viven simbióticamente con nosotros. A esto se le llama flora bacteriana.

Por otra parte si este equilibrio en el ecosistema (cuerpo humano-bacterias), se rompe, las bacterias que tienen un alto potencial patógeno, puede causar diversos síntomas, incluso la muerte.

Como se sabe existen muchos tipos de bacterias. Para hacer una separación, lo más básico yprimero que se debe hacer es una tinción Gram, la cual separa a las bacterias en Gram- y Gram+.

Las bacterias Gram positivas, tienen una membrana externa grande, con muchos tetrapéptidos formando el llamado peptidoglicano, el cual al hacer la tinción retiene el color cristal violeta característico, por otro lado las bacterias Gram negativas, al tener su membrana bacteriana más delgada no retieneel color y se le hace una tinción contrastante, generalmente con safranina tiñéndose las células con un color rojizo.

OBJETIVOS

* Demostrar la flora bacteriana de piel (en este caso palma de la mano) y de saliva.

* Determinar algunas características básicas de las colonias bacterianas.

MATERIALES Y MÉTODOS

Materiales:

- Placas petri

- Agar tripticasa soya (TSA)

-Alcohol

- Asa de platino

- Cristal violeta (colorante)

- Lugol

- Safranina (colorante)

Metodología

Parte 1: Aislamiento de bacterias.

En primer lugar se toman muestras de la piel correspondiente a la palma de la mano y también de saliva mediante cotones previamente esterilizados. Luego se coloca la muestra en las placas Petri, que contienen el medio de cultivo (TSA),esparciéndola en forma de zigzag. Finalmente se espera una semana que se reproduzcan las colonias bacterianas.

Parte 2: Observación Microscópica.

Preparación del frotis:

-Se limpia el portaobjeto con alcohol y se pasa rápidamente por la llama del mechero. Se deja enfriar.

-Se coloca una gota de caldo en 3 sectores diferentes del portaobjeto.

-Se toma un asa de platino, se esteriliza a lallama, se deja enfriar y con ella se recoge una partícula del material que se desea examinar. Se dispersa en la gota, y se extiende en una superficie adecuada (1 cm2). Se esteriliza nuevamente el asa.

-Se fija la preparación pasando rápidamente dos o tres veces por la llama del mechero, evitando el sobre calentamiento que pueda carbonizar las bacterias.

Tinción Gram, Pasos:

-Se colorea concristal violeta, al 1% durante 60 segundos, cuidando que el colorante cubra toda la extensión del preparado.

-Se elimina el exceso de colorante y se lava rápidamente con agua, manteniendo la lámina en posición inclinada.

-Se cubre la preparación con solución gran o lugol, dejándola actuar durante 60 segundos. Se lava nuevamente con agua.

-Se decolora con alcohol al 95% durante 30 segundos(o hasta que deje de salir el colorante) y se lava con agua.

-Se colorea con Safranina durante 10 segundos (contraste).

-Finalmente se lava con agua, se seca y queda lista la muestra para ser observada bajo el microscopio a 100x utilizando aceite de inmersión como es debido.


RESULTADOS Y DISCUSIÓN

En el laboratorio cultivamos bacterias en agar Tripticasa soya proveniente de laspalmas y de la saliva. Donde tras haber realizado tinción Gram observamos estructuras de estreptococos y de estafilococos en las palmas de las manos y solamente estafilococos en la muestra de saliva.
Muestra de bacterias de la palma de la mano
En la imagen tomada del microscopio podemos observar, no nítidamente, la mezcla de bacterias con formas de estafilococos y estreptococos, todas Gram-...