Guia Citogenetica

GENETICA BASICA


MODULO DE CITOGENETICA


Doctoras


Nora Constanza Contreras. Biol. MSc. (c)


Claudia Tamar Silva A. Biol. MSc


Dora Janneth Fonseca. Biol. MSc

Heidi Eliana Mateus. Md. MSc

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Unidad de Genética
Instituto de Ciencias Básicas
Facultad de Medicina
Universidad del Rosario

2.006




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NORMAS MINIMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DECITOGENÉTICA


El laboratorio de Citogenética, como cualquier otro laboratorio, es un sitio de trabajo en el cual debemos tener en cuenta algunos cuidados especiales para prevenir accidentes que puedan dañar nuestra integridad física en el momento o a largo plazo.

Tengamos en cuenta las siguientes Normas:
1. El uso de Batas de Laboratorio es Obligatorio, ya que nos protege de sustanciastoxicas y colorante.
2. No debe ingerirse ningún tipo de alimento al interior del laboratorio (esto incluye chicles).
3. La utilización de guantes es OBLIGATORIA para la manipulación de sustancias químicas y/o biológicas.
4. Antes de utilizar reactivos debemos revisar la etiqueta para saber frente a que sustancia estamos y tomar las precauciones necesarias, como uso de ropa adecuada,tapabocas, protector facial y gafas.
5. No tocar equipos que no sepamos manipular.
6. Lavarnos permanentemente las manos para evitar contaminarnos por contacto de estas con ojos y cara.
7. No llevar a la boca objetos de uso en un laboratorio, como puntas de micropitetas entre otros.
8. En caso de contacto con la piel de sustancias tóxicas como álcalis, ácidos entre otros, lavar conabundante agua y jabón y si es necesario acudir al médico.




CULTIVO CELULAR

Los cultivos celulares han permitido un gran avance en el estudio de la célula y sus características, Alexis Carrell para 1.923 había hecho crecer células en condiciones asépticas en frascos de vidrio semejantes a como se cultivan hoy; él observó que si se proporcionaba un medio ambiente apropiado y el medio de cultivose cambiaba regularmente, las células podían ser mantenidas en cultivo por largos períodos de tiempo.
El análisis cromosómico requiere de células en metafase, para una mejor clasificación y evaluación de los cromosomas; la obtención de células en esta fase requiere de un tejido con gran número de células en división, los linfocitos de sangre periférica, los fibroblastos, las células del líquidoamniótico y células de algunos tumores, las cuales deben ser cultivadas bajo ciertas condiciones in vitro, para obtener un número suficiente de células en división. Las células empleadas para cultivo cromosómico, deben ser capaces de crecer y dividirse rápidamente en el cultivo. Las células más accesibles son los leucocitos los cuales en cultivo, requieren de estimulantes mitóticos como lafitohemaglutinina, cuyo efecto transforma los linfocitos periféricos en células parecidas a blastos capaces de re- entrar en el ciclo mitótico, ya que ellos normalmente solo se dividen una vez.
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Una vez se obtienen células en proliferación activa, es posible detener células en metafase al inhibir la formación del huso acromático, mediante el uso de laColchicina. Además esta sustancia ayuda a la contracción de los cromosomas hecho que permite una mejor delineación, un extendido más eficiente y un mejor análisis. Luego, las células son expuestas a solución salina hipotónica con el fin de asegurar la dispersión adecuada y la observación de los cromosomas dentro de la membrana celular, mediante la extensión en un portaobjetos para posteriormente sercoloreados y analizados al microscopio.
Los cromosomas así obtenidos se organizan de acuerdo a su tamaño y a la disposición del centrómero, a esa organización se le conoce como CARIOTIPO. En el hombre, el cariotipo consta de 46 cromosomas, o 23 pares de los cuales, un par constituye el par sexual.

El ciclo celular
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Los cromosomas
Telómeros...