histología

Alumno: Rafael Lopes Rezende

Técnicas Histológicas y Microscopia
Preparación del Tejido
1º Paso: Obtención de la muestra:
• Biopsia; tejido vivo.
• Autopsia; tejido muerto.
• Necropsia; tejido podrido - necrosado.
2º Paso: Fijación:
• En general obtenida mediante el empleo de sustancias químicas individuales o mezclas
de estas;
• El fijador de uso más común es la formalina (soluciónacuosa de formaldehido al 37%);
• Este fijador no reacciona con los lípidos, por lo tanto es un mal fijador de las
membranas;
3º Paso: Deshidratación:
• Luego después de la fijación, se lava y deshidrata la muestra en una serie de soluciones
alcohólicas de concentración creciente hasta llegar al 100%;
• Después de eso, se utilizan solventes como el xileno o tolueno para extraer el alcohol al100%
4º Paso: Inclusión:
• Incluir la muestra en la parafina fundida a 60 grados;
• Luego después que la parafina se ha enfriado y endurecido se obterá un bloque
denominado taco;
• Coloca-se el taco en una maquina denominada micrótomo, que se encargará de hacer
cortes de 5 a 15 µm (micras) (1 micra equivale a milésima parte de 1 milímetro);
5º Paso: Coloración:
• Después de los cortes hayque hidratar la muestra con una serie de soluciones
alcohólicas en porción decreciente para que se pueda colorear con hematoxilina (color
azul) y después otra vez deshidratar con una serie de soluciones alcohólicas en porción
creciente para que se pueda colorear con eosina (color rosa).
Microscopia
Microscopia Óptica
• Microscopio de campo claro: es actualmente el microscopio más utilizadopor los
estudiantes, ello es el microscopio descendente de los utilizados en el siglo XIX. Sus
componentes son los siguientes:
o Fuente luminosa;
o Condensador;
o Platina;
o Objetivo;
o Ocular.
Las muestras a seren observadas en ese tipo de microscopio tiene que ser extremamente
finas, para que la luz pase a través de ella, y coloreadas con eosina y hematoxilina. Sin eses
pré-requisitosla muestra no se produce grado de contraste suficiente para estudio.
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Alumno: Rafael Lopes Rezende

• Microscopio de campo escuro: en ese tipo de microscopio, la lente objetiva no capta luz
directa proveniente de la fuente luminosa. El está provisto de un condensador especial que
elimina el preparado con mucha intensidad y en forma muy oblicua. Solamente los rayos de
luzrefractados por las estructuras de la muestra penetran la lente objetiva. La resolución del
microscopio de campo escuro no es mejor que la de campo claro, pero se puede detectar
partículas más pequeñas.
• Microscopio de fluorescencia: Aprovecha la capacidad algunas moléculas de florecer bajo la
luz ultravioleta, como a vitamina A y algunos neurotransmisores. La función del
microscopio defluorescencia es estudiar la fluorescencia secundaria, que es detectar
antígenos o anticuerpos en las técnicas de inmunocitoquimica.
• Microscopio confocal de barrido: combina componentes de un microscopio de campo claro
con un sistema de barrido para disecar ópticamente una muestra. Fuiste desarrollado para
estudiar la estructura de materiales biológicos. Poseí un sistema de iluminación a laserque
produce un punto de barrido muy superficial.
• Microscopio de luz ultravioleta: La imagen en este tipo de microscopio depende de la
absorción de la luz UV por las moléculas de la muestra. La muestra no puede inspeccionarse en forma directa a través del ocular porque la UV no es visible y lesiona el ojo, entonces
los resultados se registran en una placa fotográfica para q se puedaanalizar-se.
• Microscopio de polarización: es una simple modificación del microscopio de campo claro en
el cual un filtro de polarización se coloca entre la fuente de luz y la muestra, y un segundo
filtro se coloca entre o objetivo del microscopio y el observador;
Microscopia Electrónica
• Microscopio electrónico de transmisión (MET); utiliza la interacción de un haz de electrones
con la muestra...