IDENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE MONOSACÁRIDOS y DISACÁRIDOS

UNIVERSIDAD DE SUCRE / FACULTAD DE EDUCACION Y CIENCIAS
DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA / PRACTICAS DE BIOQUIMICA I - PROGRAMA DE BIOLOGÍA 2014
EXPERIENCIA 3
IDENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE MONOSACÁRIDOS y DISACÁRIDOS
INTRODUCCION
Los carbohidratos hacen presencia en los diferentes sistemas biológicos como integrantes estructurales y se pueden metabolizar o almacenar para la obtención de energíaquímica. La estructura química indica la presencia de carbono, hidrógeno y oxígeno en una relación de 1:2:1; además, se pueden representar en su fórmula química general como (CH2O)n y se caracterizan por ser moléculas con el grupo funcional aldehído o cetona. Los carbohidratos se clasifican como monosacáridos y sus derivados, oligosacáridos y polisacáridos, lo cuales pueden ser identificadoscualitativamente por diferentes ensayos y determinar su poder reductor por el grupo carbonilo que tienen en su molécula. Entre los métodos cualitativos se pueden citar las pruebas de Fehling, Tollens, Benedict, Barfoed, Seliwanoff, Bial (Orcinol-HCl), Lugol, Osazonas, Molisch, etc.
OBJETIVOS
• Identificar la presencia de carbohidratos de origen vegetal.
• Cada grupo elabora los objetivos específicosy los presenta al inicio del laboratorio.

HIPOTESIS
Cada grupo elabora la hipótesis correspondiente y la presenta al inicio del laboratorio.

MATERIALES, REACTIVOS y EQUIPOS
• POR GRUPO
• 3 Pipetas graduadas de 1, 2 y 5 ml.
• 5 tubos de ensayo por grupo.
• 1 pinza para tubos de ensayo.
• 1 Beaker de 500 ml.
• 1 Gradilla para los tubos de ensayo.
• Cronómetro

• DE USOCOMÚN
• 4 placas de calentamiento para el experimento.
• Soluciones al 2% de Glucosa, fructosa, lactosa y sacarosa.
• Reactivos de Molisch.
• Solución de Benedict.
• Reactivos de Fehling A y B • Solución de Seliwanoff
• Reactivo de Tollens • Ácido sulfúrico concentrado, [H2SO4].
PROCEDIMIENTOS
1. PRUEBA DE MOLISCH
- Marque 5 tubos de ensayo: Glucosa, fructosa, sacarosa, extractode jugo y agua.
- Coloque 1 ml de cada solución de carbohidrato y 0.2 ml del reactivo de Molisch.
- Adicione cuidadosamente por las paredes del tubo sin agitar, 1 ml de [ácido sulfúrico].
- Mire la interface entre los dos líquidos y escriba los resultados de cada tubo de ensayo.
2. ENSAYO DE BENEDICT
- Marque 5 tubos de ensayo: Glucosa, fructosa, lactosa, sacarosa y extracto de jugo.- Coloque 1 ml de cada solución de carbohidrato y 0.2 ml del reactivo de Benedict.
- Caliente en baño de maría a ebullición durante 3 minutos.
- Observe y escriba los resultados de cada tubo de ensayo.
4. PRUEBA DE FEHLING
- Marque 5 tubos de ensayo: Glucosa, fructosa, lactosa, sacarosa y extracto de jugo.
- Deposite 1 ml de cada solución de carbohidrato y 0.5 ml de cada soluciónde Fehling
(Reactivo de Fehling A y B).
- Caliente en baño de maría a ebullición durante 3 minutos.
- Observe y escriba los resultados de cada tubo de ensayo.

5. ENSAYO DE SELIWANOFF
- Marque 3 tubos de ensayo: Glucosa, fructosa, sacarosa y extracto de jugo.
- Coloque 0.5 ml de cada solución de carbohidrato y 0.5 ml del reactivo de Seliwanoff.
- Introduzca los tubos en bañode maría a ebullición durante 2 minutos.
- Observe y escriba los resultados de cada tubo de ensayo.

6. REACTIVO DE TOLLENS
- Marque 5 tubos de ensayo: Glucosa, fructosa, lactosa, sacarosa y extracto de jugo.
- Coloque 2 ml de reactivo de Tollens en cada uno de los tubos de ensayo anteriores.
- Agregue de 5 a 10 gotas a cada tubo de los carbohidratos mencionados.
- Coloque los tubosen un baño d agua a 50°C a 60°C, agite en forma suave durante el calentamiento (5 a 10 minutos)
- Un espejo de plata en el fondo en el tubo indica una respuesta positiva.
- Los tubos de ensayo se limpian con ácido nítrico para destruir el espejo de plata.
7. ENSAYO DE BIAL
- En tres tubos de ensayo agregue aproximadamente 1 ml de la muestra glucosa, fructosa, pentosa a 2.0 ml de...