INFORME DE BIOQUIMICA FOTOCOLORIMETRIA







“AÑO DE LA PROMOCIÓN DE LA INDUSTRIA RESPONSABLE
Y COMPROMISO CLIMÁTICO”












E.A.P INGENIERIA AGRONOMA


CURSO: BIOQUIMICA


DOCENTE:


ALUMNO:


TEMA: “FOTOCOLORIMETRÍA”


CICLO: III


GRUPO: “B”



CHIMBOTE - PERU









PRACTICA Nro. 1
FOTOCOLORIMETRIA

1.- INTRODUCCION:

Las técnicas colorimétricas sebasan en la medida de la absorción de radiación en la zona visible por sustancias coloreadas. En algunas ocasiones, la muestra que deseamos determinar no posee color por sí misma; en tal caso, es preciso llevar a cabo un desarrollo de color empleando reactivos que den lugar a sustancias coloreadas con la muestra que interesa estudiar.
La colorimetría y fotocolorimetría no son en realidadtécnicas distintas y la diferencia estriba en el tipo de instrumento empleado, de forma que se denomina colorímetro a aquellos aparatos en los que la longitud de onda con la que vamos a trabajar se selecciona por medio de filtros ópticos; en los fotocolorímetros o espectrofotómetros la longitud de onda se selecciona mediante dispositivos mono-cromadores.

2.- OBJETIVOS:

Obtener el espectro deabsorción de una sustancia.
Preparar una curva de calibración para una sustancia coloreada.
Determinar la concentración de una muestra problema mediante factor de calibración y curva de calibración.

3.- EQUIPOS MATERIALES Y REACTIVOS:

3.1.- EQUIPOS:

3.1.1.- Espectrofotómetro.
3.1.2.- Balanza.
3.1.3.- Agitador magnético.

3.2 MATERIALESY REACTIVOS:

3.2.1.- Azul de metileno 0,1%
3.2.1.- Sulfato de cobre 10%
3.2.1.- Dicromato de potasio 0,1%
3.2.1.- Agua destilada
3.2.1.- Pipetas de 5-10ml
3.2.1.- Matraces
3.2.1.- Probetas

4.- FUNDAMENTO TEORICO:

Utilizando términos quizás excesivamente simplistas puede definirse la espectrofotometría de absorción, como la medida de la atenuación que elmaterial a estudiar (muestra) efectúa sobre una radiación incidente sobre el mismo con un espectro definido. En general, las medidas se realizan dentro del espectro comprendido entre 220 y 800 nm, y este espectro, a su vez, puede dividirse en dos amplias zonas: la zona de la radiación visible, situada por encima de 380 nm, y la zona de la radiación ultravioleta situada por debajo de estos 380 nm.La región del infrarrojo se sitúa por encima de los 800 nm.
En el proceso de absorción de la radiación, un fotón incidente transmite su energía a una molécula (llamada absorbente) lo que da lugar a su excitación pasando a un nivel de energía superior. Este proceso se representa de la siguiente forma:

A + h A* A + calor

En la que A es el absorbente en su estado de energía bajo, A* en sunuevo estado de excitación energética y ην (h es la constante de Planck y ν la frecuencia) es la energía del fotón incidente, el cual posee una longitud de onda λ (λ*ν = c, donde c es la velocidad de la luz). A* es ordinariamente inestable y rápidamente revierte a su estado energético más bajo, perdiendo así la energía térmica correspondiente. Sólo se absorben determinadas frecuencias luminosas, yla selección de las mismas depende de la estructura de la molécula absorbente.

Leyes de la absorción de energía radiante:

Se refieren a las relaciones existentes entre la cantidad de absorbente y el grado con el que es absorbida la energía radiante. En términos generales, puede decirse que hay dos variables capaces de afectar al grado de absorción: la concentración del absorbente y lalongitud del trayecto que el rayo luminoso recorre a través de la solución. La relación entre ambas se expresa con la fórmula denominada Ley de Beer:

P = Po 10-abc
P = potencia radiante transmitida
Po = potencia radiante incidente una cantidad proporcional a la misma, medida colocando en la cubeta el solvente puro.

a = absortividad, constante característica del absorbente y de la longitud de...