informe enzimas

FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS

Noviembre 27 de 2013

1. RESUMEN
En esta práctica se realizaron diferentes procedimientos para explorar el efecto dela temperatura, la variación de pH y la presencia de cianuro sobre la actividad dela Peroxidasa, con el objetivo de evidenciar los factores que afectan la actividades las enzimas. Ya que la enzima objeto de examen en estapráctica se cataloga como óxido-redactase, se encuentra de forma abundante en hortalizas verdes, el primer procedimiento realizado fue la detección de la actividad de la Peroxidasa, posteriormente se probó el efecto de la temperatura, el efecto de la variación del pH y el efecto del cianuro para comprobar experimentalmente como afectan estos factores sobre la actividad de dicha enzima.

2.INTRODUCCION.
Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica y estructural que catalizan reacciones químicas, siempre que sean termodinámicamente posibles: una enzima hace que una reacción química que es energéticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja, sea cinéticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. En estas reacciones, lasenzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. La Peroxidasa es un tipo de enzima muy extendida en toda la escala filogenética. Pertenecen ala categoría de las óxido-reductasas, catalizan reacciones bisustrato de carácter redox, utilizando un peróxido como oxidante (a lo que deben su nombre) y un segundo sustrato de características reductoras que es oxidado por el peróxido.



2. MATERIALES Y METODOS

3.1. Materiales
Mortero de porcelana
Agua destilada
Tejido vegetal
Tubos de ensayo
Guayacol 1 %
Peróxido de hidrogeno 2 %Estufa
Solución tampón de diverso pH (5.0, 7.0, 9.0 y 12.0)
Cianuro al 2 %

3.2. Métodos
3.2.1. Detección de la actividad de la peroxidasa
En un mortero de porcelana se macero el tejido vegetal y se adiciono agua destilada. En un tubo de ensayo se mezcló 1 ml del sustrato rico en electrones (guayacol 1%), 1 ml de peróxido de hidrogeno (2%), 1 ml del macerado que se obtuvo y por último seagito.
3.2.2. Efecto de la temperatura
En tres tubos de ensayo se colocaron 1 ml de macerado vegetal en cada uno, posteriormente se deja un tubo a temperatura ambiente, los 2 restantes se calentaron durante 1 min, el primero a 37°C, el segundo a 100°C y a cada tubo se le adicionó 1 ml de guayacol al 1% y 1 ml de peróxido de hidrogeno al 2%.
3.2.3. Efecto de la variación de pH
En cuatro tubosde ensayo se adiciono 1 ml de macerado vegetal variando el pH con la solución tampón (5.0, 7.0, 9.0, 12.0) para cada uno, se le adiciono a cada uno 1 ml de guayacol al 1 % y 1 ml de peróxido de hidrogeno al 2 %.
3.2.4. Efecto del cianuro
En un tubo de ensayo se adicionaron 1 ml de macerado, 1 ml de cianuro al 0.5 %, 1 ml de guayacol al 1 % y 1 ml de peróxido de hidrogeno al 2 %.

3. RESULTADOSY DISCUSIÓN

3.1. Detección de la actividad de la peroxidasa
Al agregar el guayacol, el peróxido de hidrogeno, el macerado y agitar estos tres compuestos, la reacción del compuesto fue casi instantánea, el cambio de color rojizo se presenció en segundos, debido a la formación de quinonas, que es uno de los dos isómeros de la ciclohexanodina o bien derivado de los mismos, se adquierefundamental de las plantas en este caso el tejido vegetal que utilizamos, la quinina y el peróxido de hidrogeno reaccionan rápidamente y se convierte en ácido húmico. La velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas se incrementa con la temperatura. Sin embargo, a diferencia de lo que ocurre en otras reacciones químicas, en las reacciones catalizadas por enzimas se produce un descenso de la...