Ingenieria genetica

Introducción
La ingeniería genética persigue la modificación del patrimonio hereditario de un organismo introduciendo (o deleccionando, en su caso) en su haber génico uno o varios genes pertenecientes a un organismo de una especie distinta. El proceso puede utilizarse ya en bacterias ya en células eucariotas vegetales o animales (más adelante se detallarán los pasos a dar en cada caso); una vezadicionada o modificada la carga cromosomática, el organismo en  cuestión sintetiza la proteína deseada y el aumento del rendimiento de la producción puede obtenerse mediante el aumento en la población portadora. Las bases de la ingeniería  genética han sido el resolver estos dos problemas: localización e inserción de genes  y multiplicación redituable de las factorías logradas.
Las técnicasutilizadas por la ingeniería genética son varias y, a continuación, se describirán las más importantes; cada una atiende un aspecto o paso de la tarea de preparación y solución de los problemas específicos de esta tecnología, sin embargo muchas de ellas ha tenido éxito en otros campos tecno-científicos.

La gel-electroforesis.
El problema de encontrar, separar y analizar los fragmentos de ADNcorrespondiente a un gen específico se logró resolver sobre la base de los estudios de Linus Pauling que demostraron que las moléculas migran a distintas velocidades hacia los polos magnéticos: se colocan porciones de ADN sobre un gel de agarosa o poliacrilamida y se les permite que migren hacia los polos del campo magnético (siendo que los grupos fosfato del ADN tienen carga negativa, migrarán haciael polo positivo; las porciones más pequeñas lo harán más rápido y más lejos que las grandes). La senda seguida por el ADN y las manchas formadas se tornan visibles en una película de rayos X como el código de bandas de un producto en el supermercado.
La gel-electroforesis -nombre de esta técnica- permite tratar con bajas concentraciones de ADN, de hasta 100 nanogramos (una cienmillonésima degramo)

Marcadores: sondas y RFLPs.
Cabe entonces  individualizar cada gen sobre la cadena de ADN en los cromosomas, identificando su rol en el concierto genético. Para ello se cuenta con marcadores, esto es segmentos reconocibles de ADN a lo largo de la cadena que permite estimar la localización relativa de otros genes. El llamado ligamiento de genes, que es aún hoy el usado por los genetistasinvolucrados en el Proyecto Genoma Humano, evalúa el índice de repetición después del “crossing over” (a menor repetición, mayor distancia  entre el gen buscado y el marcador, y viceversa), este método que como ya se mencionó fue el usado por A. Sturtevant, en 1913, lleva a rastrear genes específicos en varias generaciones familiares y depende de la expresión del gen en cuestión.

Amplificación delgen (Southern blot y PCR).
Por su lado, para la amplificación del gen (u obtención de numerosas copias de un fragmento específico del ADN) los biotecnólogos cuentan con dos procedimientos que son, hoy, los más usados:
El logrado por E.M. Southern en 1975 y que lleva su nombre, comienza con la separación del ADN digerido por enzimas de restricción, los fragmentos resultantes se separan portamaño mediante la gel-electroforesis y luego se transfieren a un filtro. El ADN adherido se desnaturaliza (sometiendo las doble cadenas de ADN a alta temperatura lo que rompe los puentes hidrogenados que las mantienen unidas) y se lo hibrida (o deja que se ligue) exponiéndolo a sondas radiativas (fragmentos de ARN o ADN de cadena simple, correspondientes a los nucleótidos que son parte del gen que sedesean estudiar,  marcados con un isótopo radiativo), lo que permitirá, después del lavado del filtro de soporte, para eliminar el material que no se haya asociado a las sondas, detectar por rayos X los fragmentos de interés para su purificación y duplicación en procedimientos de estudios o manipulación.

Vectores.
Cuando se pretende que las “factorías” biotecnológicas (o una célula)...