Ingeniero Químico

Soluciones Químicas Productivas

PRUEBA DE LA RESAZURINA
La resazurina (colorante azul derivado de la oxazina) es un indicador de óxidoreducción que se vuelve incoloro cuando se le reduce químicamente por la
eliminación de oxígeno, la actividad metabólica de las bacterias presentes tiene el
efecto de cambiar el color del colorante a una velocidad directamente proporcional al
número total debacterias presentes en dicha muestra.
Este método tiene aplicación para determinar la efectividad de biocidas en procesos
que lo requieren, para explicar el procedimiento, se expondrá un caso particular de
Cervunión.
PROCEDIMIENTO
La prueba consiste en aplicar a una muestra diferentes concentraciones de biocidas y
observar después de varias horas los cambios en la coloración de la muestra.Las
muestras se deben dejar a temperatura entre 10 y 37 °C, temperaturas inferiores
pueden inhibir los microorganismos.
Después de mantener la mezcla durante algunas horas, se compara el color
resultante con una escala cuyos colores tienen los siguientes valores comparativos:
Color azul: Calificación: muy buena.
Color azul-violeta: Calificación: buena.
Rojo-violeta: Calificación:suficiente.
Color rojo: Calificación: insuficiente.
Incoloras: Calificación: mala.
El o los biocida se seleccionan teniendo en cuenta aquél que a igual dosis de otros
biocidas, permite mantener la coloración azul o azul – violeta la mayor cantidad de
tiempo. Para nuestro caso particular realizamos pruebas con dosis de biocidas de 50,
100, 150 y 200 ppm.
MATERIALES
1 Pastilla de resazurina
1 litrode agua destilada (o agua esteril)
Jeringas de 5 ml.
Probeta de 50 ml.
Frascos estériles

Soluciones Químicas Productivas

Muestras de biocidas.
Muestras de agua para determinar biocida.
BIOCIDAD UTILIZADOS
Lipesa 108
Lipesa 106
Lipesa IPTC 90
Lipesa 172
Lipesa IPTC 26
Hipoclorito de sodio
La pastilla de resazurina se adiciona en 1 litro de agua destilada, se agita hasta
lograruna dilución total en adelante a esta mezcla la llamaremos solución de
resazurina.
Se prepararon 100 ml de soluciones al 0,5% de biocidas.
En los frascos estériles se adicionan 45 ml de la muestra a analizar, posteriormente
se aplican dosis de biocida (0,5, 1.0, 1.5 y 2.0 ml para 50, 100, 150 y 200 ppm
respectivamente) y 5 ml de la solución de resazurina. Después de aplicar la solución
de laresazurina, la muestra se torna azul. Adicionalmente en uno de los frascos
estériles se adicionan 45 ml de la muestra a analizar y 5 ml de la solución de
resazurina, no se le aplica ningún biocida, este se marca como Blanco.
Nota: La medida de volúmenes debe hacerse de forma muy precisa para evitar

malas interpretaciones.

RESULTADOS DE LA PRUEBA
Después de unos minutos, algunas muestrascomienzan a tornarse rosadas, esto se
da por la alta contaminación que existe en el sistema y a que las dosis de biocida
eran insuficientes para mantener controlada la contaminación.
A continuación se muestran los resultados visuales de la prueba.
Las imágenes 1 a 4 fueron tomadas minutos después de preparar todas las
muestras.

Soluciones Químicas Productivas

Imagen 1. Blanco:

Ya setorno rosado, esto indica un alto grado de contaminación de la muestra.

Imagen 2. Lipesa 108:

Todas las muestras estan rosadas, se concluye que este biocida no sirve para
controlar la contaminación del sistema, y viendo resultados positivos con otros
biocidas, se descarta la muestra y no se continua la prueba con este producto.

Soluciones Químicas Productivas

Algo similar ocurriócon las muestras tratadas con Lipesa 106, Lipesa IPTC 90
(biocida que esta siendo usado en el sistema) por lo que también se descartaron.
Imagen 3. Lipesa IPTC 26:

Todas las muestras estan azules, se continua la prueba con este biocida para
observar resultados horas mas tarde.

Imagen 4. Lipesa 174:

Para el L-174, se usaron inicialmente 10, 20, 30 y 40 ppm, la muestra permanece
azul,...