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FACULTAD DE SALUD

BIOQUÍMICA

LABORATORIO Nº1
KINESIOLOGIA

Laboratorio 1: Características de las Proteínas

En la siguiente práctica, se realizarán tres experimentos, todos ellosrelacionados con las propiedades de las proteínas.

Experimento I

Objetivo: Estudiar la propiedad amortiguadora del pH de las proteínas.
Teoría
En las cadenas polipeptídicas de las proteínas los gruposα- amino y β- carboxilo de los aminoácidos, salvo los terminales, se encuentran constituyendo los enlaces peptídicos. De este modo los grupos que pueden cargarse eléctricamente y actuar como ácidosdébiles, confiriéndoles a las proteínas la capacidad de actuar como amortiguadores son:
1. carboxilos libres de los aminoácidos dicarboxílicos, cuyo pKa fluctúa alrededor de 4.
2. épsilon amino de lalisina, guanidino de la arginina, fenol de la tirosina, sulfhidrílo de la cisteína, cuyos pKa son superiores a 9.
3. Imidazol de la histidina cuyo pKa en las proteínas es de 5,6 a 7.
Reactivos:
HCl10 mmol/L, papel pH,
Solución de ovoalbúmina
Procedimiento:
1. En un tubo de ensayo (tubo1) coloque 1,0 ml de ovoalbúmina más 1,0 ml de agua destilada y desproteinice de la siguiente manera:Caliente el tubo con la muestra en un baño de ebullición durante 1 a 2 minutos, filtre. Complete el volumen del filtrado a 2 ml, con agua destilada.
2. Agregue 1 ml de ovoalbúmina en otro tubo de ensayo(tubo2) y agregue 1 ml de agua destilada. Agregue 1 ml de solución de HCl a cada tubo (tubo 1 y tubo 2 ) y compare el pH de ambas soluciones con papel pH. Anote sus resultados.

Experimento IIObjetivo: Estudiar la precipitación de proteínas por sales neutras.
Teoría
Las sales neutras en altas concentraciones disminuyen la solubilidad de las proteínas, lo que se debe probablemente a unadeshidratación de las moléculas proteicas. El solvente, en estos casos, se organiza alrededor de los iones de la sal, de modo que éste disminuye alrededor de las moléculas de proteínas, las que se...
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