Laboratorio de actividad enzematica

UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSE DE CALDAS
PRACTICAS DE BIOLOGIA Y MICROBIOLOGIA
Tecnología Saneamiento Ambiental
Prof. Giovanni Bogotá

LABORATORIO ACTIVIDAD ENZIMATICA
INTRODUCCION
Una enzima es un catalizador proteínico. Una proteína es un polipétalo hecho de residuos de aminoácidos y un catalizador es una sustancia que altera la velocidad de una reacción química. Las moléculassobre las cuales actúan las enzimas se llaman sustratos y las moléculas resultantes productos. Las enzimas se requieren para casi todas las reacciones celulares. La propiedad de las enzimas es que aumentan la velocidad de las raciones. Un catalizador acelera la velocidad disminuyendo la energía libre de activación de la reacción

OBJETIVOS

- Observar y analizar como una enzima acelera elproceso o reacción química catalizándola
- Confirmar que las enzimas actúan sobre sustratos específicos
- Determinar como la temperatura y el pH afectan la actividad enzimática

MATERIALES
REACTIVOS VIDRIERIA Y OTROS
Agua destilada
Solución de almidón 0.5%
Solución de celulosa
Ácido Clorhídrico 1M
Hidróxido de Sodio 1M
Benedict
Hielo* 8 tubos de ensayo
3 vasos de precipitado de 50 ml
2probetas de 10 ml
1 mechero
1 termómetro
1 pinza para tubo de ensayo
1 gradilla
2 pipetas
goteros*
1 Soporte metálico
1 Malla de asbesto
2 cronómetros*

* material aportado por los estudiantes

No olvide la reacción general catalizada por una enzima

ENZIMA + SUSTRATO === [ENZIMA – SUSTRATO ==== ENZIMA + PRODUCTO

PROCEDIMIENTO

1. ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO
- Rotule dos tubosde ensayo limpios y secos, al tubo 1 agregue 1ml solución de almidón, al 2 deposite 1 ml de solución de Celulosa,
- Agregue a cada tubo 1 ml de saliva coloque en baño Maria a 37.5 ° C durante 5 minutos.
- Saque los tubos y realíceles a cada uno de ellos la prueba de azucares simples. Qué puede inferir del resultado

2. EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

A. Efecto de latemperatura cercana a 0° Centígrados en la actividad enzimática

1. Llene una probeta con nueve mililitros de saliva (de una sola persona, la cual previamente debe haberse enjuagado la cavidad oral con agua, para eliminar restos de comida y residuos de azucares), esta saliva la empleará para el desarrollo de todo el resto de la práctica

2. Llene hasta ¾ partes de un vaso de precipitado conhielo. Tome la temperatura con la ayuda de un termómetro.

3. Rotule dos tubos de ensayo con los números 1 y 2 respectivamente

4. Agregue al tubo de ensayo 1 dos mililitros de agua destilada y al tubo 2 vierta dos mililitros de saliva previamente colectada. Ayúdese para tal tarea de dos pipetas diferentes, no olvide lavarlas).

5. Coloque los dos tubos de ensayo en el vaso de precipitado conhielo y déjelos allí durante 10 minutos.

6. Tenga listos dos tubos de ensayo limpios y secos rotúlelos con A y B se usarán mas adelante.

7. Una vez transcurridos los 10 minutos agréguele al tubo 1 dos mililitros de solución de almidón agite y con la ayuda de otra pipeta extraiga 1 ml de esa nueva solución y viértalo al tubo A. Regrese el tubo 1 al vaso de precipitado con hielo. Ponga acorrer el cronómetro .

* Realícele al tubo A la prueba de azucares simples. Escriba su resultado. No olvide lavar el tubo al finalizar.

8. Una vez transcurridos 12 minutos aproximadamente agréguele al tubo 2 dos mililitros de solución de almidón agite rápidamente y con la ayuda de otra pipeta extraiga 1 ml de esa nueva solución y viértalo al tubo B. Tras extraer la muestra REGRESE INMEDIATAMENTEel tubo 2 al vaso de precipitado con hielo. Ponga a correr el cronómetro .

* Realícele al tubo B la prueba de azucares simples. Escriba su resultado No olvide lavar el tubo al finalizar.

9. Espere que pasen tanto para el Tubo 1 como para el tubo 2 dos minutos según el cronómetro respectivo y con la ayuda de unas pipetas extraiga 1 ml de cada solución y viértalos al tubo A y al Tubo B...