Lipidos
MC Arturo Olvera Medel Centro de Diagnóstico e Industrial Monterrey, N.L. VI Congreso Regional de Químicos Farmacéuticos Biólogos Biblioteca Universitaria “Raúl Rangel Frías” 25 – 27 de Agosto de 2004
1,000 900 800 700 600 500 400 300 200 100 0
Magnitud de Causas de Muerte en los Estados Unidos 959.2
544.7
Muertes en 1996 (miles)
93.8
CVD CancerAccidentes
32.7
HIV/AIDS
American Heart Association. 1999 Heart and Stroke Statistical Update. 1998.
Costo Total Estimado a 5 años por Caso
Evento ECV Infarto agudo al miocardio Angina de pecho Angina pectoris inestable Muerte súbita Procedimientos Angioplastia Cirugia de Marcapaso Costo Promedio (1986 $) 51.211 24.980 40.581 9.078 26.916 32.465
Wittels EH et al. Am J Cardiol1990;65:432 440. –
Antecedentes
Relación de riesgo cardiovascular con el desarrollo de procesos arterioescleroticos. Identificación de factores de riesgo que promueven la aterogenesis:
•Fumar cigarrillos •Hipertension •Lipoproteinas aterogenicas •Hiperglucemia
PANEL DE LIPIDOS
Factores de riesgo (arteroesclerosis)
COLESTEROL
APOLIPOPROTEINA A&B
TRIGLICERIDOS
HDL Lp(a)
LDLColesterol Total no es la respuesta!
Niveles de colesterol y triglicéridos
Marcadores diagnósticos Transtornos de lípidos Riesgo cardiovascular
Aseguramiento clínico ?
Información detallada de Lipoproteínas Diagnóstico exacto y tratamiento de transtornos lipídicos
LIPOPROTEINAS
HDL Lp(a)
LDL
Estructura de una lipoproteina de baja densidad
Colesterol Libre Fosfolípidos α - Tocoferol β- Caroteno Trigliceridos
Apo-B
Ester de Colesterol
Clasificación de Lipoproteinas
Quilomicron VLDL
IDL
LDL
HDL
DENSIDAD DIAMETRO
0.95 80-1200
0.95-1.006 30-80
1.006-1.019 23-35
1.019-1.063 18-25
1.063-1.21 5-12 (nm)
VLDL=Lipoproteina de muy baja densidad LDL=Lipoproteina de baja densidad
IDL=Lipoproteina densidad intermedia HDL=Lipoproteina de altadensidad
Tall AR (1995) plasma cholesteryl ester tranfer protein and high-desnsity lipoproteins., new insights from molecular genetic studies Journal of Internal Medicine 237: 5-12
Medida de HDL y LDL Colesterol
LDL HDL
Clases de lipoproteinas
Quilomicrones, VLDL, y sus productos
LDL
HDL
> 30 nm
20–22 nm
9–15 nm
Potencialmente inflamatorios
Potencialmenteanti-infamatorios
Métodos Directos
•Totalmente automatizado para ensayos de rutina •Primeros métodos comerciales
-enmascara el no HDL en la etapa inicial -mide HDL-C en la segunda etapa
•Métodos de aclaramiento
-Aclaramiento del no HDL en la etpa inicial -Mide HDL en la segunda etapa
Métodos Directos de Enmascaramiento
•Método WAKO
- Método de Inmunoseparación (IS)
SIGMA
•MétodoDAIICHI
- Polímero Polianión/ detergente(PPD)
BECKMAN
•Método KWOYA
BM/Hitachi
- 1-Ciclodextrinsulato/enzimas modificadas con polietilenglicol (PEPME)
Métodos de Enmascaramiento
IS CM LDL VLDL HDL Muestra Reactivo 1 VLDL HDL PEGME CE CO LDL
CM
PPD
Lipoproteinas en muestras de paciente
HDL
LDL
CM CM
HDL
LDL
CM CM
LDL
HDL
LDL
HDL
MUESTRA NORMALMUESTRA ANORMAL
Ej. Triglicéridos Altos
Métodos Directos de Enmascaramiento
•Buenos resultados en muestras “normales” •Pobre desempeño en muestras “anormales” - niveles altos de triglicéridos y bilirrubina - baja especificidad - incapacidad para distinguir lipoproteínas
Principio de Reacción
Etapa de Aclarado CM
CM LDL VLDL HDL
Colesterol Esterasa & Colesterol Oxidasa
LDL HDLColestenona + H2 O2
CATALASA
VLDL
H2 O + O2
Etapa de análisis HDL HDL
Colesterol Esterasa & Colesterol Oxidasa
Colestenona + H2 O2 Compuesto - color
PEROXIDASA
* La azida de sodio inhibe la acción de la catalasa en la etapa de análisis
Comparación de Ultracentrifugación con métodos directos en muestras discrepantes
25
40 35
20
30
mg/dL
25 20 15 10
m g/dL
15...
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