metodos cromatograficos

UNIDAD III

MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS

3.1 INTRODUCCIÓN

La separación del analito de las posibles
interferencias existentes en una muestra es, a
menudo, una etapa de vital importancia en los
procedimientos analíticos.
El método más utilizado en todas las ramas de la
ciencia para la separación es, sin duda, la
cromatografía.

CONCEPTO Y DESARROLLO
HISTÓRICO DE LA CROMATOGRAFÍAORIGENES
•

•

•

•
•

Fue inventada y denominada así a
principios del siglo XX ( aprox. En 1906)
por el botánico ruso Mikhail Tswett
Realizó un experimento para separar
pigmentos vegetales, tales como clorofila
y xantofilas
Utilizó una columna de vidrio rellena con
carbonato de calcio finamente dividido,
por donde hizo pasar la disolución de la
muestra
vegetal,
agregandocontinuamente éter de petróleo
Las especies separadas aparecieron
como bandas coloreadas
Chroma = color graphein = escribir

Carbonato
de calcio

Éter de
petróleo
Muestra
Clorofila
Xantofila

Caroteno

DEFINICIONES

• CROMATOGRAFÍA: Conjunto importante y diverso
de métodos, que permiten separar componentes
estrechamente relacionados en mezclas complejas,
tienen en común laexistencia de dos fases: una fase
móvil y una fase estacionaria.
En la actualidad se consideran también importantes
como métodos de análisis
• FASE MÓVIL: Puede ser un gas, un líquido o un
fluido supercrítico
• FASE ESTACIONARIA: Puede ser sólida o líquida

Continuación definiciones

• CROMATOGRAMA: Gráfico obtenido de una
separación cromatográfica, presenta una serie de
picos en dondecada uno de ellos representa a un
componente de la muestra, y el área bajo cada pico
es proporcional a la concentración
• TIEMPO DE RETENCIÓN: Es el tiempo que
transcurre desde la introducción del analito hasta la
aparición del máximo del pico
• TIEMPO MUERTO: Es el tiempo en el que aparece
un pico de una sustancia que no es retenida por la
fase estacionaria

CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOSCROMATOGRÁFICOS
Los métodos cromatográficos pueden clasificarse desde
varios puntos de vista:
a). En función a como las fases estacionaria y móvil se
ponen en contacto:
Cromatografía en columna: La fase estacionaria se
mantiene en un tubo estrecho a través del cual se
hace pasar la fase móvil por presión o por
gravedad
Cromatografía plana: La fase estacionaria se
mantiene sobre unaplaca lisa, o en los intersticios
de un papel, en donde la fase móvil se desplaza
por capilaridad o por gravedad

Continuación clasificación

b). Con base en el tipo de fase móvil
Cromatografía de líquidos
Cromatografía de gases
Cromatografía de fluidos supercríticos
c). En función al fenómeno de separación
Cromatografía de adsorción: La fase
estacionaria es un sólido y la fase móvilpuede
ser un líquido, un gas o un fluido supercrítico
Cromatografía
de
partición:
La
fase
estacionaría es líquida y la fase móvil puede
ser un líquido, un gas o un fluido supercrítico

ESTUDIO DE LOS MÉTODOS
CROMATOGRÁFICOS EN BASE AL
FENÓMENO DE SEPARACIÓN

CROMATOGRAFÍA DE ELUCIÓN EN
COLUMNA
El término elución implica el transporte de una
especie a través de una columna porla adición
continua de nueva fase móvil
En la siguiente figura se representa la elución de una
muestra que contiene dos componentes: A y B
La separación de A y B ocurre porque las especies
migran a diferente velocidad debido a su diferente
distribución entre las fases móvil y estacionaria

FUNDAMENTOS DE LOS MÉTODOS
CROMATOGRÁFICOS
VELOCIDADES DE MIGRACIÓN DE LOS
SOLUTOS
La eficaciade una columna cromatográfica para
separar dos solutos depende, en parte, de las
velocidades relativas con las que eluyen las dos
especies
Esas velocidades están determinadas por la
magnitud de las constantes de los equilibrios en
función de las cuales las especies se distribuyen
entre las fases estacionaria y móvil

Continuación fundamentos

CONSTANTE DE DISTRIBUCIÓN O DE EQUILIBRIO...