Microbiologia

• Medios mantenimiento y conservación: para conservar al microorganismo durante un gran periodo de tiempo.
o Congelación: a -80ºC. Los medios tiene concentraciones bajas de azucares y se suplementa con glicerol para evitar la formación de cristales de hielo. Se usan tubos eppendorff o criotubos.
o Las levaduras se conservan en agua a 4ºC en tubos con medio SLAM. Se añadeparafina encima para producir anaerobiosis y proteger a las células.
o Liofilización: consiste en congelar y desecar la muestra.
Los medios los venden casi preparados, normalmente hay que disolverlos y esterilizarlos, si el medio lleva agar hay que hervirlo para que se disuelva y posteriormente autoclavarlo, esto cuando se distribuye en tubos.
Mantenimiento y preservación de cultivos puros.La mayoría de los laboratorios de bacteriología cuentan con una gran variedad de este tipo de cultivos, que frecuentemente se denominan colección de cultivos tipo. Es muy importante tener identificadas las bacterias del cultivo puros listas para usarse. La mayoría de las compañías industriales de productos biológicos, mantienen colecciones de cultivos bacterianos en cantidades importantes.Estos cultivos se emplean para probar la efectividad de agentes químicos míoterapéuticos y potencialmente efectivos, así como cultivos de referencia para estudios taxonómicos., como agentes de ensayo para antibióticos y vitaminas, y como cultivos de referencia que citan en las patentes de las compañías.

Métodos de preservación.

A fin de desarrollar condiciones propias para la preservación debacterias se ha realizado un considerable número de investigaciones. Es esencial que el método de preservación y mantenimiento conserve todas las características de las especies como fueron en el momento de la preservación. Algunas técnicas en uso son las siguientes:

Resiembra periódica a medios frescos.- los cultivos de bacterias se pueden

mantener en tubos de medio en los que han sidocultivados mediante pasos periódicos a medios frescos. Cuando se va a utilizar este procedimiento para mantener una colección de cultivos se deben determinar 3 cosas antes de manejarlo: el medio de cultivo apropiado para usarlo con cada cultivo, la temperatura y el tiempo que se necesita para hacer las resiembras.

Preservación de cultivos con una capa de aceite mineral.- muchas bacterias

sepreservan bien cubriendo el agar en el que van creciendo con aceite mineral estéril. Para cultivos de agar inclinado el aceite deberá cubrir mas o menos 1.5 cm pico del agar inclinado. El mantenimiento de la vialidad bajo este tratamiento varia

[pic]según la especie de bacteria pero generalmente en cuestión de años. Este método tiene la ventaja de que se pueden tomar muestras del desarrollobacteriano que esta debajo del aceite con un asa de siembra, inocular medios frescos y aun preservar el cultivo inicial. La facilidad de este método lo hace muy atractivo.

Preservación de cultivos por secado rápido en congelación (liofilización).-

este procedimiento es el mas eficaz muchas especies preservadas por esta técnica han permanecido viables e invariables por mas de 20 años. En esteprocedimiento las células se secan rápidamente, mientras son congeladas, mediante las siguientes etapas: la suspensión de células se pone en pequeños frascos que se sumergen en una mezcla de hielo seco y alcohol (-78°C) los frascos se conectan inmediatamente a una línea de alto vació y una vez que termino el secado cada frasco se sella bajo condiciones de vació.

Aislamiento y cultivo de muestras.Tipos de cultivo:
Puro o axenico: procede de una sola célula.
Mixto: por mas de una población.
Bimembre: por un microorganismo que necesita, para vivir, el que nosotros estudiamos. Por ejemplo el cultivo de fagos necesita un césped bacteriano para desarrollarse.
Los medios mas usados son:
Para bacterias: TSA, TSB. Agar sangre y agar nutritivo.
Para levaduras: YEPD, agar saboureau y agar malta....