Métodos y técnicas de laboratorio para el diagnostico y detección de bacterias fitopatógenas

MÉTODOS Y TÉCNICAS DE LABORATORIO PARA EL DIAGNOSTICO Y DETECCIÓN DE BACTERIAS FITOPATÓGENAS

I. INTRODUCCIÓN

Los métodos y técnicas para aislar bacterias deben tener en cuenta que las poblaciones bacterianas deben ser consideradas como mezclas, en los cuales en ciertos momentos pueden predominar los patógenos, pero en otros, estas pueden ser las menos numerosas. Además deben reconocer queen un medio de cultivo los saprofitos contaminantes pueden crecer más rápido que el patógeno de interés quedando este contaminado, los métodos usados de aislar o purificar las bacterias con la preparación de estriados y las series de difusión. Por medio de los cuales se consiguen colonias separadas con gran probabilidad de que su origen provenga de una sola célula. Para lograr estos métodos esnecesario comenzar por hacer una suspensión de bacterias

OBJETIVOS

 Conocer los principales métodos y técnicas de laboratorio para el diagnostico y detección de bacterias fitopatógenas

II. FUNDAMENTO TEÓRICO

Métodos Serológicos

Otra manera de realizar el diagnóstico de bacteriasfitopatógenas en una determinada muestra, es a través del uso de la Serología. Las técnicas serológicas permiten la detección e identificación de estos patógenos en menor tiempo que el usado por el método tradicional de aislamiento e identificación, a través de pruebas morfológicas, fisiológicas y bioquímicas (ya discutido) y en forma precisa, lo que hace que estas técnicas sean de uso frecuente en loslaboratorios de diagnóstico. (La discusión de estas técnicas son tomadas del libro "Manual de laboratorio. Diagnóstico de hongos, bacterias y nematodos

Características antigénicas de las bacterias: Las células bacterianas no son antígenos homogéneos sino que están compuestas por numerosos antígenos, a modo de mosaico, distribuidos en la pared celular, y en los flagelos. Por otro lado, losconstituyentes de la pared celular varían según que la bacteria sea Gram (+) o Gram (-). Así, las bacterias Gram (+) pueden poseer dos tipos de constituyentes antigénicos: los debidos a la pared, de gran poder antigénico entre los que figuran algunas proteínas, polisacáridos y ácidos teicoicos. Los capsulares sólo se encuentran en aquellas bacterias provistas de ella, estando formados por polímeros deazúcares. En las bacterias Gram (-), los antígenos de la pared tienen como constituyente principal, un complejo polisacarídico cuya especificidad antigénica viene en función de la naturaleza y variabilidad de las cadenas de azúcares que lo componen, no de la pared lipídica. Estos antígenos somáticos de la bacterias Gram (-) se denominan antígenos-O, debido al tipo de enlace y la posición en las cadenasde los azúcares, siendo específicos de cada grupo de bacterias. Los antígenos flagelares son moléculas de proteínas fibrosas que constituyen los cilios de las bacterias flageladas y se les denomina antígenos-H, aunque los determinantes antigénicos responsables de su especificidad son desconocidos. En algunos casos existen antígenos capsulares, aunque a veces se tratan de estructuras externas dela pared, formadas por polisacáridos altamente polimerizados. Estas sustancias son inmunógenas y en general específicas de tipo.

Test de aglutinación: Al poner un antígeno en presencia de sus anticuerpos específicos se produce la combinación entre ellos, dando lugar a la formación de un agregado, que a lo largo del proceso va haciéndose más voluminoso y se observa más claramente al flocular enla suspensión que lo contiene. En las soluciones acuosas, las bacterias se mantienen dispersas gracias a los grupos hidrófilos que poseen en su pared. La aglutinación se va a producir por medio de los anticuerpos específicos y sus determinantes antígenos. Al agregar un antisuero, los determinantes antigénicos de la pared bacteriana se bloquean por la fijación de los anticuerpos. Como éstos...