PCR y electroforesis


Universidad de los Andes
Facultad de Farmacia y Bioanálisis
Escuela de Bioanálisis
Cátedra Biología MolecularPráctica 1
Pcr (Reacción en cadena de la polimerasa), y electroforesisDatos:
Liliana C.I
Páez Engris C.IMorillo Adrián C.I 21207990




1. Curva de calibración de distancia de migración (eje X) Vs. Logaritmo del tamaño dela banda (eje Y):


X (distancia cm) Y (log pb)


Curva de calibración


Ejemplo:
Cálculo del tamaño debanda de la muestra 1:
Con la ecuación de la recta: y= m (x)+b
y es log de pares de bases.
m es la pendiente que según la curva de calibración corresponde a 0,146.
x es la distancia recorridapor las bases de las diferentes muestras problemas.
b es el punto de corte que corresponde a 1,5994.
Con estos valores calculamos:
Logpb= 0,146 (7,5) + 1,5994 = 2,6944
Calculamos el antilogaritmode este valor para obtener el número de pares de bases que corresponde para la muestra y da 495 pb.

2. Gel de electroforesis de la práctica de PCR. Señalar las bandas observadas y los tamañosaproximados de acuerdo a los cálculos de la curva de calibración. Discuta si corresponden las bandas esperadas con las observadas en el gel.












Tamaño de pares de bases en lasmuestras problema:
Para estas muestras el patrón de banda es de 500 pb:
Muestra 1: 495pb.
Muestra 2: 433pb. No dio en ensayo, razonar.
Para estas muestras el patrón de banda es de 200 pb:
Muestra 3:...