Pigmentos vegetales y cromatografía en papel

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LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
“PIGMENTOS VEGETALES, CROMATOGRAFÍA EN PAPEL Y ESPECTROFOTOMETRÍA”

INTEGRANTES:
KARLA CERDA TÉLLEZ.
DANIELA COLLAO VIDAL.
KATERIN PALMA SALAS.
ALEJANDRA QUILAQUEO BUSTOS
NATALIA SAAVEDRA GONZÁLEZ
CURSO: BIOQUÍMICA
PROFESOR: LEONARDO ANABALÓN RODRÍGUEZ.
FECHA DE ENTREGA: MARTES 11 DE OCTUBRE DE 2011.
INTRODUCCIÓN

El sol es una fuente de energíaconstante a todos los seres vivos, esta energía es transformada en energía química, con la ayuda de organismos productores. La fotosíntesis es el proceso por el cual se lleva a cabo esta transformación, específicamente en las células vegetales de las hojas. En las células encontramos a los cloroplastos, organelos que juegan un rol crucial en la fotosíntesis, pues en ellos se alojan pigmentosfotorreceptores que captan la luz solar visible que luego es transformada. Se pueden encontrar varios tipos de pigmentos que participan en la foto absorción de la luz, tales como clorofila a, clorofila b, bacteriofilas, entre otras.
Para poder separar y estudiar cada pigmento, se recurre a una técnica conocida como cromatografía. En este caso, se utilizado la cromatografía en papel, una de lostipos de cromatografía que permite analizar y extraer moléculas dependiendo, por ejemplo de su tamaño, o polaridad entre otras características. Este método consiste en dejar la muestra que será separada por absorbencia del papel en una cámara de cromatografía (la cual está cerrada), luego a esto se continua con una segunda fase en donde se cortan los segmentos del papel cromatográfico y se eluyenpor separado con un solvente para distinguir las moléculas, o ente caso los pigmentos.
Por último se realiza un estudio de absorbancia de longitud de onda para cada pigmento eluido anteriormente. Esto se puede llevar a cabo, gracias a una técnica llamada espectrofotometría, la cual permite conocer cuantitativamente el rango de absorción de luz, pasando por la infrarroja, visible y laultravioleta, utilizando monocromadores, los que son más sensibles permitiendo captar las diferentes longitudes de onda presentes. Todo este análisis se realiza en un instrumento conocido como espectrofotómetro, en donde se ubican cubetas con muestras de moléculas, a las cuales se le hará el estudio de absorvancia observando los peaks se apreciables, para luego compararlos con la bibliografía y asípoder identificar el pigmento trabajado.

El objetivo principal de este práctico es identificar pigmentos que se encuentran en mayor abundancia en una hoja de acelga, para esto se recurrirá a las técnicas anteriormente nombradas, cromatografía y espectrofotometría.

ACTIVIDAD 1:
OBTENCIÓN DE PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS
ACTIVIDAD 1.1:
Extracción de los pigmentos:
MATERIALES MÉTODOS
- 1hoja de acelga
- Mortero
- Embudo
- Papel Filtro
- Matraz Erlenmeyer
- 10 ml de Acetona
- Espátula
- Pizeta - Con ayuda del mortero macerar la hoja de acelga.
- Una vez triturada, adicionar 10 ml de acetona,
- Dejar reposar durante 5 min.
- Depositar adecuadamente el papel filtro dentro del embudo y adherirlo a sus paredes con agua destilada.
- Introducir el embudo al matraz Erlenmayerde 100 ml.
- Verter el macerado de acelga al interior del embudo con la finalidad de separar por decantación los pigmentos fotosintéticos.
- Una vez decantado, guardar el extracto para utilizarlo en la actividad siguiente.

Observaciones:
Los pigmentos clorofílicos son insolubles en el agua. Pero sí son solubles en solventes orgánicos como por ejemplo el alcohol etílico y acetona. Por lotanto, permiten eluír los componentes de la acelga. Por eso que es necesario dejar reposar el macerado en este compuesto insoluble.

ACTIVIDAD 1.2
CROMATOGRAFÍA DE LOS PIGMENTOS
MATERIALES MÉTODOS
- Matraz Erlenmayer
- Extracto acetónico de los pigmentos
- Pinzas
- Papel cromatográfico de 3x9 cm.
- Vidrio reloj
- Tijeras
- Acetona - Con ayuda de una pinza introducir verticalmente el...
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