Práctica colinesterasa

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE SAN LUIS POTOSI.
FACULTAD DE MEDICINA
LICENCIATURA EN CIENCIAS AMBIENTALES Y SALUD.

Taller de Ecosistemas en Riesgo II

REPORTE DE LA PRACTICA “BIOMARCADORES BIOQUIMICOS: COLINESTERASA”

Dra. Donaji Gonzales Mille

Malti Nessi Gutiérrez
Paola Goiricelaya Garay
Luz Mariela Piña Orozco
Gabriela Elizabeth Pérez Calvo
María de Lourdes Mendoza Flores

4toSEMESTRE

SAN LUIS POTOSI SLP 16 MARZO 2011

ÍNDICE
I. Reporte de Practica…………………………………………………………………………………………………..3
1.1. Procedimiento……………………………………………………………………………………………………….4
1.2. Resultados…………………………………………………………………………………………………………….5
1.3. Discusión……………………………………………………………………………………………………………….5
1.4.Conclusión…………………………………………………………………………………………………………….5
2. Espectrofotometría………………………………………………………………………………………………….6
2.1. Definiciones……………………………………………………………………………………………………….7,8
3. Casos de aplicación…………………………………………………………………………………………………..9
4. Diseño experimental………………………………………………………………………………………………..9
4.1. Antecedentes……………………………………………………………………………………………………9,10
4.2. Descripción…………………………………………………………………………………………………………11
4.3. Justificación…………………………………………………………………………………………………………12
4.4.Objetivo Específico………………………………………………………………………………………………12
4.5. Objetivo Particulares……………………………………………………………………………………………12
4.6. Metodología………………………………………………………………………………………………………..12
4.7. Criterios de Inclusión…………………………………………………………………………………………..13
5. Bibliografía……………………………………………………………………………………………………………..14

1- REPORTE DE LA PRÁCTICA “BIOMARCADORES BIOQUIMICOS: COLINESTERASA”INTRODUCCION:
La colinesterasa hidroliza la butiriltiocolina y butirato. La tiocolina reacciona con el acido 5.5’-ditiobis-2-nitrato (DTNB) y forma 2-nitromercaptobenzoato, según el siguiente esquema de la reacción:
Colinesterasa
Butiriltiocolina + h2O Tiocolina + butirato
Tiocolina + DTNB 2-nitromercaptobenzoato
La velocidad de formación de 2- nitromercaptobenzoato,determinado fotométricamente, es proporcional a la actividad enzimática de la colinesterasa en la muestra ensayada.
La colinesterasa es una enzima presente en el plasma y sintetizada en el hígado. Su función fisiológica no se conoce claramente, aunque se le atribuye un papel importante como regulador de la concentración de la colina en el plasma.
La determinación de su actividad nos ayuda aevaluar la función hepática, detectar la exposición excesiva a plaguicidas organofosforados e identificar a pacientes con formas atípicas de la enzima que presentan una sensibilidad aumentada al anestésico succinilcolina.
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
MATERIALES:
Para la realización de esta práctica se utilizaron lossiguientes materiales:
* Reactivos:

R1Tampón | Fosfato PH 7.7 50 mmol/L5.5 DTNB 0.25mmol/L |
R2Sustrato | Butiriltiocolina 7mmol/L |

* Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 405nm.
* Baño termoestable a 25 °C, 30 °C o 37 °C ( ±0.1 °C)
* Cubetas de 1.0 cm de paso de luz
* Equipamiento habitual de laboratorio* Muestras (suero o plasma heparinizados o con EDTA. Estabilidad: 7-dias a 2-8 °C).
PROCEDIMIENTO:
1) Al inicio de la realización de la práctica ya se contaba con ciertas condiciones del ensayo:
-Longitud de onda: 405 nm
-Cubeta: 1 cm paso de luz
-Temperatura constante 25 °C-Espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
2) Se tomó una muestra de sangre a uno de nuestros compañeros para posteriormente poder hacer la lectura de la absorbancia. De la cual solo tomamos el plasma ya que la enzima a evaluar (Colinesterasa) se encuentra en el plasma sanguíneo.
3) La muestra de sangre se colocó en la...