Practica 7 Microbiologia

Se utilizan diversas técnicas para separar un microrganismo de otro y obtenerlos en cultivos puros, par luego identificarlos, estudiando sus características como las propiedades culturales, bioquímicas de susceptibilidad a antibióticos, etc.
La medida del crecimiento y muerte de los microorganismos en el laboratorio requiere técnicas especiales. Algunas técnicas son medidas indirectas. Estasmiden una propiedad - la turbidez, el peso seco, o una actividad metabólica - de la masa de células de una población. Otras técnicas son directas. Las medidas directas incluyen los recuentos directos al microscopio o recuento electrónico, el recuento en placa, o el cálculo del número más probable (NMP). (A veces la filtración es una etapa preliminar en las medidas directas.)
El recuento directo almicroscopio o el recuento electrónico proporcionan un recuento de todas las células, tanto las vivas como las muertas. Un recuento de viables mide sólo las células vivas de una población, es decir, aquellas capaces de reproducirse (viable significa "que puede vivir"). Los recuentos en placa y el NMP son recuentos de viables. Cuando se usa la filtración, se obtiene un recuento de viables. Cada unade estas técnicas tienen sus ventajas y sus inconvenientes.

 Realizar las técnicas de siembra de muestras y aislamiento para la obtención de cultivos puro.
 Obtención de cultivos puros de microorganismos mediante estría en medio sólido y mantenimiento de los mismos en tubos de agar inclinado.

Técnicas de siembra:
El método de siembra por estría en placa
Es el método más fácil y elmás usado para obtener cultivos axénicos.
Para ello, se esterilizan los materiales:

Luego con un asa de siembra se toma una muestra de la población mixta y a continuación se hacen estrías sobre la superficie de un medio sólido preparado en una placa Petri .

Conforme se van haciendo estrías en zigzag con el asa, cada vez se van depositando en la superficie del medio menosmicroorganismos.
A continuación, se flamea el asa, se toca en la región donde se han realizado las últimas estrías y se continúa la siembra con la misma técnica, en la superficie de medio sin sembrar aún.
Repitiendo este proceso varias veces se logra separar células individuales.

A continuación, las placas se incuban en un lugar adecuado, permitiendo que las células aisladas experimenten un númerosuficiente de divisiones para formar colonias visibles.

Aunque cada colonia posiblemente representa un clon derivado de una sola célula, no podemos asegurarlo.
Quizás, dos células quedaron depositadas tan juntas que han originado una única colonia mixta. Por tanto, para asegurarnos de que hemos obtenido un cultivo axénico, conviene repetir el procedimiento a partir de una colonia bien aisladaen la primera placa. Las colonias que se desarrollen la segunda vez, serán, casi con toda seguridad, cultivos axénicos.
Los métodos de vertido en placa y extensión en placa
En estos métodos, las suspensiones de células microbianas se diluyenantes de su siembra en placa. Se siguen estas técnicas cuando la muestra contiene tantos microorganismos, que la dilución no se puede realizar en una solaetapa. Por ejemplo, una suspensión con mil millones de células por mililitro debe ser diluida 107 veces para obtener una suspensión con un centenar de células por mililitro, Por tanto, se realizan diluciones seriadas (en varias etapas), normalmente de diez en diez, pero a veces de cien en cien. Para realizar diluciones de diez en diez, se añade 1 ml de la suspensión bacteriana a 9 ml (le medioestéril o solución salina, igualmente estéril. Se agita vigorosamente para diluir las células y el proceso se repite cuantas veces sea necesario. A continuación, se puede proceder de dos maneras diferentes.
En el método de vertido en placa, las muestras diluidas se mezclan con agar fundido y se vierten en placa. Algunas colonias quedarán embebidas en el agar y otras crecerán en la superficie. Las...