Practica de Laboratorio_Genetica_Operon Lactosa









Introducción

El proceso donde los genes se encienden y apagan esta dado por regulaciones génicas como ser el Operón lactosa en la Escherichia coli, es capaz de construir sus nutrientes incluyendo ácidos nucleicos proteínas y lípidos, la energía necesaria para llevar a cabo estas reacciones bioquímicas proviene del metabolismo de la glucosa proceso esencial en los seres vivosque se expresa de forma constitutiva Escherichia coli crece normalmente en medios ricos en glucosa al agregar lactosa al medio se induce la expresión de los genes que la desdoblan en galactosa y glucosa si la lactosa y la glucosa están presentes en el medio de E. coli emplea preferentemente como fuente de carbono a la glucosa el cual el Operón lac se reprime con un regulador positivo, se dice queestá bajo control positivo el microorganismo. Solo fermenta glucosa aunque haya lactosa el ennegrecimiento del medio indica que el mecanismo produce acido sulfhídrico.





Flujograma






Materiales

Cepa en gelosa simple inclinada de escherichia coli(control positivo)
Cepa en gelosa simple inclinada de salmonella sp (control negativo)
Medio de cultivo diferencial, Kligler(KIA) contiene 0.1% de glucosa y 1% de lactosa
Asa bacteriológica en punta
Incubadora
Gradilla
Mechero bunsen
Guantes
Mascarilla
Papel toalla


Datos

1) Defina los conceptos aplicados a la regulación génica
a. Promotor: secuencia que controla la frecuencia con que se trascribe el gen
b. Operador: es el sitio al que se pega la proteína represora
c. Inductor: sustrato o compuestocuya presencia induce la expresión de los genes.
d. Gen regulador: secuencia de ADN que codifica para la proteína reguladora que reconoce la secuencia de la región del operador. El gen regulador está cerca de los genes estructurales del operón pero no está inmediatamente al lado. Abreviadamente se le denomina gen i.(1)

2) Explicar con un ejemplo las diferencias fundamentales entre el controlnegativo y el control positivo
R//. Control positivo: Se dice que un sistema está bajo control positivo cuando el producto del gen regulador activa la expresión de los genes, actúa como un activador. Control negativo: se dice que un sistema está bajo control negativo cuando el producto del genregulador reprime o impide la expresión de los genes, actúa como un represor. (2)

3) ¿Cómo funciona el operón lactosa en presencia y ausencia de lactosa?
R//. En ausencia de lactosa la proteína represora se pega a los operadores y se pega a la transcripción de los genes estructurales debido a que la transcripción se produce solamente cuando el represor no se une al operador, se dice que está bajocontrol negativo. Si la lactosa y la glucosa están presentes en el medio, E.coli emplea preferentemente como fuente de carbono a la glucosa en el cual el operón se reprime con un regulador positivo y se dice que está bajando el control positivo.(3)










4) Cite ejemplos y compare características de los genes que se expresan en forma constitutiva, adaptiva, inducible y represible?
R//.Los genes que codifican para las enzimas necesarias para el metabolismo básico celular se están expresando continuamente, es decir, se expresan de forma constitutiva o continua. Por tal motivo, a este tipo de genes se les denomina, "genes que guardan la casa" o genes constitutivos.
Los genes que se expresan solamente en determinadas situaciones y que, por consiguiente, codifican para enzimas quesolamente se necesitan en momentos concretos. A este tipo de genes se les llama genes adaptativos y a las enzimas codificadas por ellos, sistemas enzimáticos adaptativos
Sistemas inducibles: cuando el sustrato sobre el que va actuar la enzima provoca la síntesis del enzima. Al efecto del sustrato se le denomina inducción positiva. Por ejemplo, en E. coli en ausencia de galactósido (sustrato)...