Practica de urocultivo

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Material:
*1 mechero
*1 asa bacteriológica
*1 vaso de precipitado de plástico de 250 ml
*2 portaobjetos
*2 tubos de ensayo de 10x100
*Gradilla
*1 pinza de disección
*1 puente de tinción
*4 pipetas Pasteur
*1 bulbo
*10 cajas de petri
*1 matraz de erlenmeyer de 250 ml
*1 tripie
*Agua destilada
Equipo
*1 microscopio
*Kit para tinción de Gram
*1 Balanza granataria
Procedimiento:1. Preparamos medios de cultivo.
2. Cultivar de la siguiente manera:
3. Agitar el frasco aproximadamente 25 veces antes de sembrar.
4. Con un asa calibrada 1:1000, tomar la muestra de orina de la siguiente forma: Flamear y enfriar el asa. Sostener verticalmente el asa y sumergirla inmediatamente por debajo de la superficie de la muestra de orina. Mover el asa rectamente hacia arriba y haciaabajo.
5. Retirar el asa e inocular la placa Gelosa sangre con una línea recta en el centro de la placa.
6. Atravesar esa línea por otra línea recta que pase por el centro de la primera. Posteriormente diseminar masivamente toda la placa.
7. Con el asa calibrada 1:100 tomar nuevamente otra muestra de orina y sembrar por estría cruzada en los siguientes medios: Mac Conkey, Biggy, sal y manitol
8.Incubar todas las placas a 37°C durante 24 a 48 horas.
9. Colocar aproximadamente 3 ml de orina en un tubo de 13x100, centrifugar a 1500 rpm durante 2 minutos. Decantar el sobrenadante.
10. Estudiamos sedimento urinario colocando una gota en un portaobjetos y cubrir con un cubreobjetos.
11. Observar a saco débil y seco fuerte buscando:
*Leucocitos
*Eritrocitos
*Células
*Bacterias
*Otroselementos formes (Bacterias, levaduras, cristales)
12. Después del período de incubación, en la placa de Gelosa sangre, hacer la cuenta de colonias y calcular las unidades formadoras de colonias por mililitro e interpretar los resultados.
13. Revisar las demás placas si hay crecimiento significativo de infección de vías urinarias teñir con GRAM.
14. Reportar.

Introducción:
Urocultivo:
Esel cultivo que se le hace a la orina para determinar:
*Presencia de bacterias que causan infecciones del aparato urinario agudas o crónicas.
*El poder patógeno por recuento de colonias
*La indicación de antibióticos a los que el germen sea sensible por medio del antibiograma.
Ante la sospecha de una infección del tracto genitourinario es necesario el envío de una muestra de orina allaboratorio para la realización de un urocultivo. La finalidad del urocultivo es detectar y cuantificar los microorganismos causantes de la infección. Normalmente al hablar de infección urinaria se emplea el término ‘’Bacteriuria’’ que significa presencia de bacterias en orina. Sin embargo, las bacterias pueden estar presentes en la orina como contaminantes de origen fecal o vaginal. Por ello paradistinguir una infección de una posible contaminación se habla de bacteriuria significativa, que implica un recuento superior a 100 000 UFC/ml.
El urocultivo se utiliza para diagnosticar bacteriuria, la orina constituye un método excelente para cultivar la mayor parte de microorganismos que infectan el aparato urinario.
Es de gran utilidad clínica:
1.- Cuando los síntomas indican una posible infecciónurinaria como dolor y sensación de calor al orinar, así como urgencia frecuente de orinar.
2.- Cuando un paciente esta canalizado por largo tiempo, aunque no muestre síntomas de infección.
3.- En mujeres embarazadas para monitorear cualquier bacteria en la orina que pueda causar algún problema al bebé.
La recolección de orina para un urocultivo tiene exigencias mayores que para un análisissimple. Se deben utilizar envases estériles para evitar la contaminación de la muestra.
El urocultivo se realiza mediante la siembra de una pequeña cantidad de orina homogeneizada, lo que permite la cuantificación de las eventuales bacterias presentes. Las bacterias se contabilizan utilizando el criterio de UFC/ml,[] porque de acuerdo a esta técnica se considera que cada bacteria en la muestra...
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