Practica trigliceridos

UNIVERSIDAD LATINA DE MÈXICO

TRIGLICERIDOS.

MARTINA GUERRERO MATA
BIOQUIMICA
MODULO II

TRIGLICERIDOS.
MÈTODO GPO-PAP
Dos moléculas de AcilCoA formada a partir de ácidos grasos, se combinan con elglicerol 3- fosfatidato (P de 1.2 diacilglicerol) por un conjunto de enzimas convierte el fosfatidato en 1-2 diacilgliceron y luego en triglicérido.
Los triglicéridos son esteres de alcohol gliceroly asC. Grasos.
MÈTODO COLORIMETRICO
Los triglicéridos se determinan a partir de hidrólisis enzimática con lipasas. El indicador es una quinoneimina formada por hidrogeno peróxido 4-aminofenazona y4-cloròfenol, bajo en la influencia catalítica de peroxidasa.
PRINCIPIO.
Triglicéridos + H2O--------- Glicerol + ácidos grasos
Glicerol + ATP ----------- glicerol-3-fosfato + ADP
Glicerol-3-fosfato O2----------- dihidroxiacetona + H2O
2H2O + 4-aminofenazona + 4 clorofenol-------- quinoneimina + HCL + 4H2O
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma
PREPARACION DE LOS REACTIVOS.
R I b tampónListo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad cuando se conserca entre +2 y +8 C
R I b. reactivo enzima
Reconstruir un vial de reactivo enzima R I b Cat. TR210 con 15 ml de tampón de R I a.Reconstruir un vial de reactivo enzima R I b Cat TR213 con un pequeño volumen de tampón R I a. y después transferir todo el conternido al frasco R I a, enjuagado el vial R I b varias veces. Losreactivos son estables durante 21 dias entre +2 +8 C o 3 dias entre +15 y +25 C protegidos de la luz.
CAL. Patrón
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8 C.PROCEDIMIENTO.
1.-longitud de onda: 500nm , Hg 546nm
2.- cubeta: 1cm de espesor
3.- temperatura de espesor: 20-25 C o 37 C
4.- medición: frente a reactivo blanco
PIPETEAR EN TUBOS DE ENSAYO.| REACTIVO BLANCO | PATRÓN | MUESTRA |
MUESTRA | --------------- | ---------------- | 10 |
PATRÓN | ----------------- | 10 | -------- |...