Preparacion de medios de cultivo

1.- Objetivo Aprender a preparar e identificar los diferentes medios de cultivo que pueden ser utilizados dentro del laboratorio de microbiología. 2.- Fundamento teórico Como definición un medio de cultivo es una solución acuosa que está compuesta por varios nutrientes que permiten el crecimiento de microorganismos. Estos son utilizados para el estudio e identificación de microorganismos. Losmedios de cultivo están compuestos por diferentes macronutrientes, micronutrientes, inhibidores, iones y factores que brindan consistencia al medio, como algunos ejemplos son los siguientes: Macronutrientes
Macronutriente Carbono Hidrogeno Oxigeno Nitrógeno Fosforo Azufre Potasio Magnesio Sodio Calcio Hierro Forma de entrada En forma de carbohidrato o aminoácido En forma de agua y en compuestosorgánicos En forma de agua, carbohidrato, aminoácido En forma de aminoácidos principalmente En forma de fosfatos orgánicos e inorgánicos En forma de aminoácidos principalmente En forma de ion En forma de ion En forma de ion En forma de ion En forma de quelato Función celular Forma parte de proteínas, carbohidratos, etc. Forma parte de proteínas, carbohidratos, etc. Forma parte de proteínas,carbohidratos, etc. Requerido en el metabolismo de proteínas Se requiere para la síntesis de ácidos nucleídos y fosfolípidos Se requiere para la síntesis de aminoácidos Sirve como cofactor en reacciones químicas, en síntesis proteica Funciona como estabilizador de los ribosomas Transporte de iones Da estructura a la pared celular Se requiere en la función de respiración celular

MicronutrientesMicronutrientes Cobalto Cobre Manganeso Molibdeno Níquel Selenio Vanadio Zinc Función celular Transcarboxilasa Citocromo C oxidasa, fotosíntesis Activador de muchas enzimas Algunas enzimas que contienen flavinas; nitrogenasa, nitrato reductasa, sulfito oxidasa. La mayoría de las hidrogenasas; coenzima F430 de metanogenos Formato deshidrogenasa; algunas hidrogenasas y el aminoácido selenocisteina Vanadionitrogenasa Anhbidrasa carbónica, RNA y DNA polimerasas

Facultad de Odontología

QFB Saulo Esteban Andrade Rincón

Laboratorio de Microbiología

Manual de prácticas de laboratorio

De la misma forma en que los medios de cultivo contienen gran variedad de macronutrientes, micronutrientes e iones, también, dependiendo el tipo de medio de cultivo, estos cuentan con indicadores de pH,inhibidores enzimáticos para evitar el crecimiento de algún tipo de microorganismo, nutrientes específicos para promocionar el desarrollo de otros microorganismos, así como indicadores biológicos para demostrar alguna característica especifica de algún microorganismo. A su vez existen medios de cultivo que además de lograr el crecimiento microbiano sirven para poner en evidencia diferentes factores,bioquímicos o mecánicos que son provocados por el metabolismo microbiano y que realza las cualidades microbiológicas y facilita su estudio e identificación. Ejemplos: Movilidad, metabolismo de compuestos orgánicos o inorgánicos no muy comunes que puedan provocar cambios visibles únicos en el medio (ej. Hidrólisis de caseína), lisis celular (ej. Hemolisis en agar sangre), producción de piocinas,demostración de la sensibilidad microbiana, indicadores de pH (ej. Fermentación del manitol, MSA). Debido a la gran cantidad de funciones y a las características que tienen los medios de cultivo estos son clasificados de diversas formas: Por su estado físico: a) Medios líquidos: Son medios de cultivo que carecen de agar, agente solidificante, en ellos el crecimiento bacteriano es evidenciado por laformación de turbidez o algún precipitado. Ejemplo: Caldos nutritivos, infusiones, caldos selectivos (selenito cistina, caldo tetrationato). b) Medios semisólidos: Este tipo de medios solo contienen un 0.5% de agar como agente solidificante, son utilizados por lo general en pruebas de movilidad. Ejemplos: Agar MIO, Medio SIM. c) Medios sólidos: Estos contienen aproximadamente 1.5% a 2.0% de agar,...