Presencia De Anticuerpos Contra Esat-6 Y Cfp-10 De Mycobactrium Tuberculosis En Sujetos Asintomáticos Mediante Western Blot

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON
FACULTAD DE MEDICINA

Presencia de anticuerpos contra ESAT-6 y CFP-10 de Mycobactrium tuberculosis en sujetos asintomáticos mediante Western blot

POR:
AYDEE SANCHEZ PEREZ

JUNIO 2010.

Lugar de trabajo:

El presente trabajo se realizò en el departamento de Inmunologia, laboratorio de Inmunologia Molecular de la Facultad de Medicina de laUniversidad Autonoma de Nuevo Leon
Bajo la dirección del Dr. Adrian G. Rosas Taraco y la Co-direccion de la Dra. Alma Yolanda Arce Mendoza.

DEDICATORIA:

A DIOS:
que es por èl que excisto y camino en mi vida, por que sin èl no estaría en donde estoy y no lograrìa lo que he logrado, èl me guía y me acompaña siempre.

A MIS PADRES:

Que me aman, me han cuidado siempre, me han guiado y enseñadocon su ejemplo a ser emprendedora y tener mucha fortaleza para vivir y superarme. Por su confianza, su esfuerzo para darme la educación que tengo y por su apoyo incondicional en las decisiones que he tomado.

A MIS HERMANOS:

Que me han apoyado en mis decisiones y su paciencia hacia mi. En especial a mi HERMANO GERARDO por su EZFUERZO en ayudarme para terminar mi licenciatura.

A PABLO:Que lo amo y me da fuerzas para seguir adelante, que me acompaña y me apoya en todas mis decisiones, por su paciencia, confianza y entusiasmo, por el tiempo que invirtió para proporcionarme su ayuda en la realización de esta tesis.
AGRADECIMIENTOS

* Dr. Adrián G. Rosas Taraco por darme la oportunidad de trabajar con usted y tenerme confianza, sus enseñanzas, asesoría, ayuda, diciplinaenseñada, consejos y paciencia a lo largo de la realización de este trabajo y por la convivencia diaria en el laboratorio, siempre estuvo pendiente dispuesto a apoyarme en todo.
* Dra. Alma Y. Arce por su apoyo, su confianza, por su entusiasmo hacia ayudar a las personas y por la convivencia en el laboratorio.
* Mis amigos Esmeralda, Yazmín, Andrea, Ivan, Alfredo, Omar y Paola por estarsiempre al pendiente de mí y por su apoyo.
* A mis compañeros del laboratorio de inmunología Ivonne, Alberto, Fernando, Pili, Mari, por su apoyo y ayuda que de una u otra forma recibí de ustedes.
* Al Fondo Secretarial d Investigacion en Salud y Seguridad Social SSA/IMSS/ISSSTE-CONACYT CONVOCATORIA 2007-01. 68733. Desarrollo y validación de una prueba de diagnostico de la tuberulosispulmonar empleando los antígenos ESAT-6 y CFP-10 de Mycobacterium tuberculosis uniendo a microesferas. Por el financiamiento de este trabajo de tesis y la beca otorgada.

CONTENIDO GENERAL
LUGAR DE TRABAJO………………………………………………………..I
DEDICATORIA…………………………………………………………..…….II
AGRADECIMIENTOS………………………………………………………..III
CONTENIDO GENERAL……………………………………………….……IV
RESUMEN………………………………………………………………….….VCAPITULO 1. ANTECEDENTES……………………………………….…...1
1.1 Epitemlogia de la tuberculosis…………………………………….…..1
1.2 Ruta de infección del bacilo de la tuberculosis………………….…3
1.3 Metodos de diagnostico de Tuberculosis……………………….…..5
1.4.1 Timción de Ziehhl Neelsen…………………………….…….…6
1.4.2 Cultivo Bacyeriano………………………………………………6
1.4.3 Intrdermorreacción………………………………………………71.4.4 Identificacion de microbacterias directamente de muestras clínicas mediante la amplificación de acdidos nicleicos….8
1.4 Proteinas de la región RD-1 del genoma de M. tuberculosis y respuesta de anticuerpos………………………………………………10
CAPITULO 2. JUSTIFICACION……………………………………….…….12
CAPITULO 3. OBJETIVOS…………………………………………….…….13
3.1 OBKETIVO GENERAL……………………………………………….…..13
3.2OBJETIVOS PARTICULARES………………………………………….13
CAPITULO 4. ESTRATEGIA GENERAL……………………………………14

CAPITULO 5. METODOLOGIA………………………………………………15
5.1 Obtencion de proteínas rESAT-6 y rCFP-10 de Mycrobacterium tuberculosis a partir de cultivo E coli tranformadas……………………15
5.2 Purificacion de proteínas utilizando resina de Niquel………………15
5.3 Cuantificacion de proteínas por el método de Bradford……………16
5.4...