Proteina

TITULACION POTENCIOMETRICA ACIDO/BASE DE UN AMINOACIDO Y DETERMINACION DE CONSTANTES DE ACIDEZ Y PUNTO ISOLECTRICO
Gabriel J. Castillo Santiago, Catherine Del Rio Rodríguez, Valerie Rivera Santiago y Denimar Rios
*Departamento de Ciencias y Tecnología. Universidad Interamermicana-Arecibo
Fecha: 25 de Septiembre del 2012

RESUMEN
En el laboratorio de Titulación potenciometrica acido/base deun aminoácido y determinación de constantes de acidez y punto isoeléctrico el objetivo principal era determinar el punto isoeléctrico de un amino acido por medio de una curva de titulación. Para lograr determinar el punto isoeléctrico del amino acido, se utilizo como titulante una base fuerte, en esta ocasión se utilizo NaOH. Esto fue posible por el monitoreo constante de pH del aminoácido. elamino ácido correspondiente fue cisteína y este tiene un punto isoeléctrico de 5.07. Al realizar la curva para determinar el punto isoeléctrico experimental se obtuvo que fue de 5.58. además se calculo el error experimental del ejercicio para determinar en que se falló al realizar la titulación, y se obtuvo que fue de 10.1%.
INTRODUCCION
La cisteína (Cys) es un aminoácido no esencial, lo quesignifica esto es que puede ser sintetizado por los humanos. Lo codifican los codones UGU y UGC. La parte de la cadena donde se encuentra la cisteína es el tiol que es no polar y por esto la cisteína es clasificada como un aminoácido hidrofílico. El tiol es susceptible a la oxidación para dar lugar a puentes disulfuros derivados de las cisteínas que tienen un portante papel estructural en muchasproteínas. La cisteína también es llamada cistina, pero esta última se trata de un dímero de dos cisteínas a través de un puente disulfuro. El punto isoeléctrico (pI) se define como el pH en el cual las cargas positivas igualan a las cargas negativas y no existe movimiento en un campo eléctrico. Para calcularlo se deben utilizar los pKa. Los aminoácidos pueden existir como sal interna,
llamadazwitterión. Esto ocurre porque un electrón del oxígeno del grupo carboxilo es atraído por el grupo amino NH2 que está en posición alfa y quedando este como grupo amoníaco NH3+. Se establecerá el punto de equivalencia de una titulación ácido/base a través de una gráfica y se determinaran las constantes de acidez para cisteína y su punto isoeléctrico.
PROCEDIMIENTO EXPIREMENTAL
En un vaso deprecipitado se colocó 25.0mL de Cisteína y se le agregó agua destilada. Luego, se colocó un agitador magnético en la solución y el electrodo del metro de pH. Se colocó la bureta con NaOH y se midió el pH de la solución. Se realizó un ensayo preliminar agregando titulante de 1mL cada vez y se registraba el pH, hasta que este llegó a un pH de 11, se continuó el mismo procedimiento hasta obtener 6 datosadicionales. Finalmente, se realizó una Curva de titulación de pH vs Volumen de NaOH, donde se determinaron los volúmenes de equivalencia y pI, los valores de pK1 y pK2 y los valores de las constantes de acidez.
RESULTADOS

Grafica 1. Curva de Titulacion de NaOH & pH
Concentración del anión | 0.075 g/L |
Volumen Total | 0.12L |
Punto Isoeléctrico | 5.58 |
pH | 5.58 |
pKa| 0.746 |
Ka | 1.7 E -1 |
H3O | 2.63 E-6 |

Tabla 1. Resultados obtenidos mediante la determinación del punto isoeléctrico de un amino acido

Concentración del anión | C=12Ve*NVt C=0.045L(0.20gL)0.12L=0.075g/L |
Determinaciónón del volumen total | VT = 12 Ve + Volumen inicial de la soluciónVT = 0.075L + 0.045L = 0.12L |
Punto Isoeléctrico | 12(pK1+pK2) = pI12(1.58 +9.58) = pI5.58 =pIpI = pH |
Determinación del pKa | pKa = -logpHpKa = log 5.58pKa = 0.746 |
Evaluación del Ka por medio del pKa | Ka = 10-pKaKa = 10-(0.746)Ka = 1.7 E -1 |
Evaluación de H3O por medio de pH | [H3O+] = 10-pH[H3O+] = 10-5.58[H3O+] = 2.63E -6 |
% de error | % de error = pI experimental-pI teoricopI teorico*100% de error = 5.07-5.585.07*100=10.1% |
Tabla 2. Comparativa de los diferentes...