Punto Isoelectrico De Proteinas

¿ES POSIBLE DETERMINAR EL pI DE ALGUNAS PROTEÍNAS Y ADEMÁS PERCIBIR EL EFECTO DEL ALCOHOL COMO AGENTE PRECIPITANTE?

¿Qué pasa?

* Se llevó a cabo la determinación del punto isoeléctrico de diferentes proteínas como la gelatina, la ovoalbúmina y caseinato de sodio 0.1N con base a la adición de diferentes reactivos como el agua destilada, ácido acético a 0.1N 0.001N y 1N, y NaOH 1N, acetatode sodio 0.1N y alcohol etílico, en diferentes porcentajes.

* CONCLUSIÓN

En el pI de la caseína se observa que en el tubo No. 5 se obtiene un pH de 4.7, en la gelatina se da en el tubo no. 1 con un pH de 4, notándose el pI respectivamente con una precipitación mayor que en los demás tubos.
Teóricamente el pH de la caseína y la gelatina es de 4.7, lo que indica que dentro de la practicael pI de la caseína y la gelatina deberían encontrarse en los tubos 5, debido a que se tiene en estos un pH = 4.7 y en el caso de la ovoalbúmina el pI teórico es de 4.6, experimentalmente debe de ayarse en el tubo 4 o en su defecto en el 5, puesto que el pH04 en ambos casos.
En el caso de la ovoalbúmina y la caseína los valores experimentales y teóricos coinciden, puesto que se obtiene un pHigual, mientras que en la gelatina estos datos no coinciden.


Conceptos
Todas las macromoléculas de la naturaleza adquieren una carga cuando se dispersan en agua. Una característica de las proteínas y otros biopolímeros es que la carga total que adquieren depende del pH del medio.
Las proteínas tienen una carga neta dependiendo del pH del medio en el que se encuentren y de los aminoácidosque la componen, así como de las cargas de cualquier ligando que se encuentre unido a la proteína de forma covalente (irreversible).
El punto isoeléctrico (pI) del es el pH en el cual una molécula particular o la superficie no lleva ninguna carga eléctrica y presenta el mínimo de solubilidad ya que no hay repulsión electrostática entre las moléculas. El pI es constante para un compuestodeterminado en condiciones específicas de fuerza iónica y temperatura.
Las moléculas anfóteras llamadas Zwitterions contienen cargas positivas y negativas dependiendo de los grupos funcionales presentes en la molécula. Son afectadas por el pH de su ambiente circundante y pueden convertirse más positivamente o negativamente - cargada debido a la pérdida o al aumento de los protones (H+). El pI de unamolécula puede afectar a su solubilidad en cierto pH. Tales moléculas tienen solubilidad mínima en soluciones del agua o de sal en el pH que corresponde a su pI y se ven a menudo al precipitado fuera de la solución. Las moléculas anfóteras biológicas tales como proteínas contienen los grupos funcionales ácido y básico. Los aminoácidos que componen las proteínas pueden ser positivos, negativos,neutrales o polares en naturaleza, y juntos dan a proteína su carga total.
Cuando pH>pI, la proteína tiene carga negativa.
Cuando pH<pI, la proteína tiene carga positiva.
* DESNATURALIZACIÓN
Consiste en el desplegamiento de la estructura nativa plegada característica de la cadena polipeptidica de las moléculas globulares, normalmente es irreversible.
La mayoría de las proteínas sufrendesnaturalización a valores de pH menores de 6 y mayores de 8, debido al cambio de cargas en, los radicales de los residuos aminoacidicos, lo que ocasiona la ruptura de puentes de hidrogeno debida a radicales y enlaces iónicos.
Muchas de las moléculas proteicas solo retienen su actividad biológica dentro de una fluctuación muy limitada de temperatura y de pH. La exposición de proteínas solubles oglobulares a pH extremos o a temperaturas elevadas, le hace experimentar un cambio conocido como desnaturalización, consiste en un descenso de solubilidad. Puesto que los enlaces químicos covalentes del esqueleto péptico de las proteínas no se rompen durante este tratamiento relativamente suave, se ha llegado a la conclusión que la estructura primaria permanece intacta. La mayor parte de las...