reconocimiento de lipidos

Extracción y
Reconocimiento de
Lípidos 
 

Extracción de lípidos de cerebro de
vacuno o de yema de huevo.
1.-

8 g de cerebro ( o 1 yema de huevo)+ 2 g de Na2SO4 anhidro
Macerar hasta formar unamasa compacta

Masa compacta + 10 mL de éter etílico
Mezclar por 1-2 minutos
Filtrar y el filtrado traspasarlo a un tubo de ensayo largo.
2.Tubo de ensayo con filtrado
(Lípidos solubles en éter)

3.5mL de filtrado + 10 mL acetona fría
Mezclar vigorosamente

Precipitan
fosfolípidos

Trasvasijar a 2 tubos de centrífuga clínica y cubrir los tubos con parafilm
Centrifugar por 5 minutos4.Sobrenadant
e
esteroles
(colesterol)
Fosfolípidos
(Lecitina)

Centrífuga clínica

Precipitado concentrado en el
fondo del tubo (fosfolípidos)

SEPARAR EL SOBRENADANTE DEL PRECIPITADO
Depositar el sobrenadanteen vaso pp. y
llevar a placa calefactora hasta sequedad)

Dejar enfriar hasta hacer el
reconocimiento de colesterol

Depositar ambos precipitados en un tubo largo
hasta hacer el reconocimiento defosfolípidos
(lecitina)

Reconocimiento de Fósforo en Fosfolípidos
(Lecitina)
1.- - Agregar al tubo con precipitado 0,5 mL de H SO 10N
2
4
- Calentar directamente al mechero flameando el tubo
hastaobservar carbonización de la materia orgánica

2.-

-Agregar al tubo con materia carbonizada 2-3 gotas de HNO 3
al 25%.
-Calentar directamente al mechero flameando el tubo hasta
observar que la materiaorgánica carbonizada se decolora
(Oxidación de la materia orgánica).
-Dejar enfriar.
CO O CH2
CO O CH

O

CH3
+

CH2 O P O CH2 CH2 N CH3
O-

CH3

Carbonización
Oxidación
De la materia
orgánica

CO2PO43-

3.-

Agregue al tubo 2 mL de H2O destilada, mezcle.
Agregue al tubo 2 mL Molibdato de amonio 2,5% y mezcle.

CO O CH2
CO O CH

CH3
AgregarO y 2 mL de metol
+
CH2 O P O CH2 CH2 N CH3
O-

PO43-+ (NH4)2MoO4
Fosfato

Molibdato de amonio
+6

(NH4)3PO4 · 12MoO3 + metol
Fosfomolibdato de amonio

CH3

+6

(NH4)3PO4 · 12 MoO3
Fosfomolibdato de amonio
+2

(NH4)3PO4 · 12 MoO
Subóxido de molibdeno...