Recuento de coliformes fecales por método del número más probable

Desarrollo

Definiciones

• Organismos coliformes
Organismos capaces de crecimiento aeróbico ya sea 308 ± 1k (35 ± 1°C) ó 310 ± 1k (37 ± 1°C) en un medio de cultivo líquido lactosado conproducción de aciso y gas dentro de un periodo de 48 h.

• Organismos coliformes fecales (termotolerantes)
Organismos coliformes como se describe en 3.1 que tienen las mismas propiedades fermentativas a317 ± 0.5k (44 ± 0.5°C).

• Escherichia coli presuntiva (E. coli)
Organismos coliformes termotolerantes como se describe en 3.2 que también producen Indol a partir de tripofano a 317k (44°C).Método

• Principio
El método se basa en la inoculación de alicuotas de la muestra, diluida o sin diluir, en una serie de tubos de un medio de cultivo liquido conteniendo lactosa.
Los tubos seexaminan a las 24 y 48 horas de incubación ya sea a 308 o 310k (35 o 37°C).
Cada uno de los que muestran turbidez con producción de gas se resiembra en un medio confirmativo más selectivo y, cuando sebusca E. coli presuntiva, en un medio en el que se pueda demostrar la producción de indel.
Se lleva acabo la incubación de estos medios confirmativos basta por 48 horas ya sea 308 ó 310k (35 o 37°C)para la detección de organismos coliformes y a 317k (44°C) para organismos termotolerantes y E. coli.
Mediante tablas estadísticas se lleva acabo él calculo del numero más probable (NMP) de organismoscoliformes, organismos coliformes termotolerantes y E. coli que pueda estar presente en 100 cm3 de muestra, a partir de los números de los tubos que dan resultados confirmativos positivos.

• EquipoAparte de los equipos que se suministran estériles, el material de vidrio y el resto del
equipo deben esterilizarse.
o Incubadora capaz de mantener una temperatura de 308 ± 1k (35 + 1°C) ó 310 ± 1k(37 ± 1°C) y 317 ± 0.5k (44 ± 0.5°C).
o Estufa capaz de mantener una temperatura de 453 a 473k (180 a 200°C).
o Autoclave u olla de presión o con manómetro.
o Potenciómetro.
o Balanza...