Resumen ross pawlina

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Técnicas Histológicas y Microscopia
Preparación del Tejido 1º Paso: Obtención de la muestra: • Biopsia; tejido vivo. • Autopsia; tejido muerto. • Necropsia; tejido podrido - necrosado. 2º Paso: Fijación: • En general obtenida mediante el empleo de sustancias químicas individuales o mezclas de estas; • El fijador de uso más común es la formalina (solución acuosa de formaldehido al 37%); • Estefijador no reacciona con los lípidos, por lo tanto es un mal fijador de las membranas; 3º Paso: Deshidratación: • Luego después de la fijación, se lava y deshidrata la muestra en una serie de soluciones alcohólicas de concentración creciente hasta llegar al 100%; • Después de eso, se utilizan solventes como el xileno o tolueno para extraer el alcohol al 100% 4º Paso: Inclusión: • Incluir la muestraen la parafina fundida a 60 grados; • Luego después que la parafina se ha enfriado y endurecido se obterá un bloque denominado taco; • Coloca-se el taco en una maquina denominada micrótomo, que se encargará de hacer cortes de 5 a 15 µm (micras) (1 micra equivale a milésima parte de 1 milímetro); 5º Paso: Coloración: • Después de los cortes hay que hidratar la muestra con una serie de solucionesalcohólicas en porción decreciente para que se pueda colorear con hematoxilina (color azul) y después otra vez deshidratar con una serie de soluciones alcohólicas en porción creciente para que se pueda colorear con eosina (color rosa). Microscopia Microscopia Óptica • Microscopio de campo claro: es actualmente el microscopio más utilizado por los estudiantes, ello es el microscopio descendente delos utilizados en el siglo XIX. Sus componentes son los siguientes: o Fuente luminosa; o Condensador; o Platina; o Objetivo; o Ocular. Las muestras a seren observadas en ese tipo de microscopio tiene que ser extremamente finas, para que la luz pase a través de ella, y coloreadas con eosina y hematoxilina. Sin eses pré-requisitos la muestra no se produce grado de contraste suficiente para estudio.Página 1 de 100

• Microscopio de campo escuro: en ese tipo de microscopio, la lente objetiva no capta luz directa proveniente de la fuente luminosa. El está provisto de un condensador especial que elimina el preparado con mucha intensidad y en forma muy oblicua. Solamente los rayos de luz refractados por las estructuras de la muestra penetran la lente objetiva. La resolución del microscopio decampo escuro no es mejor que la de campo claro, pero se puede detectar partículas más pequeñas. • Microscopio de fluorescencia: Aprovecha la capacidad algunas moléculas de florecer bajo la luz ultravioleta, como a vitamina A y algunos neurotransmisores. La función del microscopio de fluorescencia es estudiar la fluorescencia secundaria, que es detectar antígenos o anticuerpos en las técnicas deinmunocitoquimica. • Microscopio confocal de barrido: combina componentes de un microscopio de campo claro con un sistema de barrido para disecar ópticamente una muestra. Fuiste desarrollado para estudiar la estructura de materiales biológicos. Poseí un sistema de iluminación a laser que produce un punto de barrido muy superficial. • Microscopio de luz ultravioleta: La imagen en este tipo demicroscopio depende de la absorción de la luz UV por las moléculas de la muestra. La muestra no puede inspeccionarse en forma directa a través del ocular porque la UV no es visible y lesiona el ojo, entonces los resultados se registran en una placa fotográfica para q se pueda analizar-se. • Microscopio de polarización: es una simple modificación del microscopio de campo claro en el cual un filtro depolarización se coloca entre la fuente de luz y la muestra, y un segundo filtro se coloca entre o objetivo del microscopio y el observador; Microscopia Electrónica • Microscopio electrónico de transmisión (MET); utiliza la interacción de un haz de electrones con la muestra para producir una imagen. • Microscopio electrónico de barrido (MEB); el haz de electrones no atraviesa la muestra sino que...
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