Separación De Proteínas Por Electroforesis En Gel De Poliacrilamida

SEPARACIÓN DE PROTEÍNAS POR ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA
DATOS EXPERIMENTALES E INFORME
Características de los electroferogramas a diferentes % T
Característica %T (acrilamida total)
7.5 10.0 12.5
Longitud del gel antes de teñir (l) [cm] 6.5 6.4 6.0
Longitud del gel después de teñir (l´) [cm] 7.4 7.3 7.5
Distancia recorrida por el colorante (f) [cm] 5.7 5.6 4.9
Distanciarecorrida por el colorante (f´) [cm] 6.5 6.4 6.5
Numero de bandas Suero 15 11 15
Leche 7 7 6
Clara 9 11 10

Movilidad electroforética relativa promedio
% T
Acrilamida total Proteína Valores de m [cm] Distancia promedio recorrida m ̅ [cm] Movilidad electroforética relativa

Log

M M´ (Mx100) (M´x100)

7.5 Ovoalbúmina 5.6 5.7 5.5 5.6 0.86297 0.86154 1.93599 1.93527Seroalbúmina 4.7 4.7 4.8 4.7333 0.72941 0.72820 1.86297 1.86225
Caseína 5.7 5.8 5.6 5.7 0.87838 0.87692 1.94368 1.94296

10.0 Ovoalbúmina 4.3 4.3 4.3 4.3 0.67319 0.67187 1.82814 1.82729
Seroalbúmina 3.4 3.3 3.2 3.3 0.51663 0.51563 1.71318 1.71233
Caseína 3.9 4.1 4.2 4.0667 0.63666 0.63542 1.80391 1.80306

12.5 Ovoalbúmina 3.2 3.4 3.5 3.3667 0.43973 0.51795 1.64319 1.71429
Seroalbúmina 2.7 2.52.6 2.6 0.42449 0.40000 1.62787 1.60206
Caseína 3.5 3.3 2.9 3.2333 0.52788 0.49743 1.72254 1.69673

Construir la grafica de Ferguson colocando en las ordenadas Log de las movilidades electroforéticas relativas y en las abscisas el % T.


Calculo de movilidad electroforética relativa. Usando las siguientes formulas:
M=(l/(l´))(m ̅/f) M´=(m ̅/(f´))
Donde:
l : Longitud del gel antes deteñir [cm]
l´ : Longitud del gel después de teñir [cm]
m ̅ : Distancia promedio recorrida [cm]
f: Distancia recorrida por el colorante [cm]
M: movilidad electroforética relativa

M_(7.5)ovoalbúmina=((6.5 cm)/(7.4 cm))((5.6 cm)/(5.7 cm))
M_((7.5) ovoalbúmina)=0.86297
〖M´〗_(7.5)ovoalbúmina=((5.6 cm)/(6.5 cm))
〖M´〗_((7.5) ovoalbúmina)=0.86154

M_(7.5)seroalbúmina=((6.5 cm)/(7.4 cm))((4.7333 cm)/(5.7 cm))
M_((7.5) seroalbúmina)=0.72941
〖M´〗_(7.5)seroalbúmina=(( 4.7333 cm)/(6.5 cm))
〖M´〗_((7.5) seroalbúmina)=0.72820

M_(7.5)caseína=((6.5 cm)/(7.4 cm))(( 5.7 cm)/(5.7 cm))
M_((7.5) caseína)=0.87838
〖M´〗_(7.5)caseína=(( 5.7 cm)/(6.5 cm))
〖M´〗_((7.5) caseína)=0.87692

M_(10.0)ovoalbúmina=((6.4 cm)/(7.3 cm))((4.3 cm)/(5.6 cm))
M_((10.0) ovoalbúmina)=0.67319〖M´〗_(10.0)ovoalbúmina=((4.3 cm)/(6.4 cm))
〖M´〗_((10.0) ovoalbúmina)=0.67187
M_(10.0)seroalbúmina=((6.4 cm)/(7.3 cm))((3.3 cm)/(5.6 cm))
M_((10.0) seroalbúmina)=0.51663
〖M´〗_(10.0)seroalbúmina=((3.3 cm)/(6.4 cm))
〖M´〗_((10.0) seroalbúmina)=0.51563

M_(10.0)caseína=((6.4 cm)/(7.3 cm))((4.0667 cm)/(5.6 cm))
M_((10.0) caseína)=0.63666
〖M´〗_(10.0)caseína=((4.0667 cm)/(6.4 cm))
〖M´〗_((10.0)caseína)=0.63542

M_(12.5)ovoalbúmina=((6.0 cm)/(7.5 cm))((3.3667 cm)/(4.9 cm))
M_(12.5)ovoalbúmina=0.43973
〖M´〗_(12.5)ovoalbúmina=((3.3667 cm)/(6.5 cm))
〖M´〗_(12.5)ovoalbúmina=0.51795

M_(12.5)seroalbúmina=((6.0 cm)/(7.5 cm))((2.6 cm)/(4.9 cm))
M_(12.5)seroalbúmina=0.42449
〖M´〗_(12.5)seroalbúmina=((2.6 cm)/(6.5 cm))
〖M´〗_(12.5)seroalbúmina=0.40000

M_(12.5)caseína=((6.0 cm)/(7.5 cm))((3.2333cm)/(4.9 cm))
M_(12.5)caseína=0.52788
〖M´〗_(12.5)caseína=((3.2333 cm)/(6.5 cm))
〖M´〗_(12.5)caseína=0.497


Cuadro comparativo
Proteína Pendiente (-) Ordenada Coeficiente de correlación
Ovoalbúmina 0.044 2.265 0.9884
Seroalbúmina 0.058 2.388 0.9884
Caseína 0.047 2.204 0.9874

Donde la ordenada al origen es la densidad de carga de la proteína y la pendiente nos relaciona el peso molecular.Establecemos que:
seroalbúmina>ovoalbúmina>caseína

DISCUSIÓN DE RESULTADOS
El tamaño molecular relativo de las proteínas es directamente relacionado a su movilidad dentro del electroferograma. Esto se debe al porcentaje de poliacrilamida total, ya que a mayor concentración hay mas interacción de entrecruzamientos y reduce el espacio intermolecular (reduce el tamaño del poro),...