Separacion de lipidos

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PRACTICA Nº 8

SEPARACIÓN DE LIPIDOS

OBJETIVOS:
1. Separar las moléculas más importantes de lípidos presentes en la yema de huevo en base a las propiedades físicas de solubilidad y saponificación

2. Identificar las moléculas de lípidos obtenidas mediante pruebas específicas basada en sus propiedades químicas

INTRODUCCION:Los lípidos son un conjunto heterogéneo de moléculas orgánicas, cuya característica fundamental es ser insolubles en agua y solubles en solventes orgánicos apolares. Comprende sustancias de estructura y función biológica muy diversa. Estas funciónes pueden ser: a) energética como los ácidos grasos de cadena larga que son los más abundantes y se almacenan en forma de ésteres de glicerol(triacilgliceridos) b) Estructural como los fosfolípidos y esfingolípidos que son componentes importantes de las membranas celulares c) Hormonal (esteroides, prostaglandinas) y d) Vitaminas: A y D. Tienen además propiedades físicas importantes como: solubilidad y saponificación en las cuáles se basan los procedimientos de separación

La yema de huevo es una fuente rica y variada de lípidosademás de grasas simples contiene esteroles y fosfolípidos que son separados en base a su solubilidad, siendo relativamente fácil obtener colesterol cristalino puro como una de las fracciones. Después de separados de la mezcla los lípidos, se pueden caracterizar parcialmente mediante pruebas específicas aplicadas a cada fracciónPARTE EXPERIMENTAL

Materiales:
* Agitador de vidrio
* Balones de 500 mL base redonda para Rotoevaporador
* Base de corcho para balones de fondo redondo
* Beakers de 100 mL
* Embudo de vidrio
* Embudo de Porcelana
* Gradilla para tubos de ensayo
* Matraz Erlenmeyer de 125 mL
* Matraz Erlenmeyer de 250mL
* Mortero y mazo
* Tapones de goma
* Trampa para vacío
* Tubos de ensayo
* Tubos para centrífuga

Equipos:
* Campana extractora de gases
* Centrífuga
* Estufa
* Rotoevaporador
* Bomba para recirculación de agua
* Bomba de Vacío

Reactivos:
* Acetona
* ÁcidoClorhídrico
* Ácido Sulfúrico
* Anhídrido Acético
* Bisulfato de Potasio
* Cloroformo
* Cloruro de Cadmio
* Cloruro de Estaño
* Etanol
* Éter Etílico
* Hidróxido de Potasio
* Metanol
* Molibdato de Amonio

PRUEBAS DE SEPARACION

Experimento 1. SEPARACION DE LIPIDOSa) Romper un huevo en dos mitades y separar la clara de la yema
b) Colocar la yema en un matraz de 250 mL y añadir 50 mL de metanol y 50 mL de éter.
c) Tapar el matraz con un tapón de goma y agitar su contenido vigorosamente por un minuto.
d) Dejar reposar la mezcla 10 minutos y después filtrar por gravedad a través de papel filtro en un vaso de precipitado seco.e) Lavar el residuo en el papel de filtro con una porción de 20 mL de partes iguales de metanol y éter.

¡Cual es el residuo insoluble? (CUIDADO CON FUEGO).

Experimento 2. SEPARACION DE LECITINAS POR PRECIPITACION

a) Evaporar el filtrado del experimento anterior en un evaporador rotatorio (rotoevaporador) hasta obtener un residuo sólido.
b) Dejar queel balón de evaporación se enfríe a temperatura ambiente.
c) Disolver el residuo en 10 mL de éter y transferir lentamente la solución a un vaso de precipitado que contenga 10 mL de acetona agitando a medida que se añade la solución de éter a la acetona, con otros 20 mL de acetona terminar de transvasar el contenido del balón al beaker. EL PRECIPITADO QUE SE FORMA ES MAYORMENTE LECITINA....
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