tincion de zhielh



Coloración de Ziehl Neelsen.
OBJETIVOS:
 

Realizar la tinción de Ziehl-Neelsen a partir de expectoraciones de lospropios alumnos.
•
Visualizar las tinciones de Ziehl-Neelsen positivas.
FUNDAMENTOS DE LA PRÁCTICA:
La tinción de Ziehl-Neelsen es una técnica de tinción diferencial que se basaen que las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos(ácidos micólicos) decadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que lesconfieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-acido, despuésde la tinción con colorantes básicos. Las micobacterias absorben loscolorantes solo muy lentamente debido a la elevada proporción de ceras ylípidos en la pared celular. Para acelerar la absorción del colorante fuscina yasí la formación del complejo micolatofusina en la paredcelular, se calientala solución de fuscina fenicada aplicada sobre el preparado normalmentehasta la formación de vapores. Una vez que las micobacterias han absorbidoel colorante, difícilmente lo ceden a pesar del tratamiento con solucióndecolorante alcohol-ácido clorhídrico. Por esto se denominan bacilos alcoholacido resistente o BARR y aparecen en el preparado microscópico teñidasde rojo,mientras que todos los microorganismos no resistentes a los ácidosse tiñen de acuerdo con la contratinción.1Esta tinción tiene interés desde el punto de vista del diagnóstico clínicopuesto que algunos microorganismos patógenos ácido-alcohol resistentes,tales como Mycobacterimum tuberculosis son patógenos muy importantespara los humanos.2
MICOBACTERIAS.
Las micobacterias son bacilos aerobios noformadores de esporas, existenmás de 50 especies de Mycobacterium, las cuales incluyen muchas que sonsaprófitas. Entre las especies consideradas
patógenas
tenemos al
M.tuberculosis
cuyo único reservorio es el humano, es el agente causal de latuberculosis pulmonar y diseminada. El
M. leprae
en el causante de la lepray al igual que en el M. tuberculosis su reservorio es el humano.
Mycobacteriumbovis
también esta considerado dentro de este grupo,origina una enfermedad similar atuberculosis.3Otras especies
potencialmente patógenas
en humanos tales como: el
M. avium-
intracellulare y las atípicas con frecuenciainfectan a pacientes con SIDA, son patógenosoportunistas en otras personasinmunodeficientes, y en ocasiones producen enfermedad en pacientes consistema inmunitario normal.3
Lasmicobacterias no constituyen el único grupo que tienenpropiedades alcohol-acido resistentes.
Las especies de
Nocardia y Rhodococcus
poseen una alcohol-acido resistencia parcial así como“La razón habla, la ignorancia y el error gritan” anónimo.



 
Cátedra de Microbiología – Universidad Central del Ecuador
Legionella micdadei
causante de neumonía. Los quistes de los génerosCryptosporidium e Isospora
tienen resistencia definida a las tinciones conacido alcohol.5
Pared Celular de las bacteriasAcido- Alcohol Resistentes(BAAR).
Químicamente, la pared celular delos BAAR consiste en un esqueletoformado por dos tipos de polímeros,unidos covalentemente entre sí:

Un peptidoglucano especial (ladiferencia más importante esque en vez de N-acetilmurámico existeN-glucolil-murámico);

Un arabinogalactano de gran peso molecular.7Ambos polímeros se encuentran enlazados a través de fosfodiéster entreuna unidad de murámico y una de las arabinosas. Pero a su vez, esteesqueleto se une covalentemente a los ácidos micólicos.7Los ácidos micólicos son ß-hidroxiácidos grasos ramificados en a, cuyalongitud de cadena es grande (desde C78 a C91 en Mycobacterium). Estánunidos alesqueleto de la P.C. de forma uniforme, a través de enlaces conlos -OH en 5 de las unidades de arabinosa.7Por lo tanto, el esqueleto de la P.C. de estas bacterias consiste en:
 peptidoglucano---arabinogalactano---ácidos micólicos.
Pero aparte de este esqueleto complejo, la P.C. de las bacterias ácido-alcohol resistentes exhibe una variedad de lípidos:
1) Glucolípidos:a) Micolatos de trehalosa
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