tincion









OBJETIVO
INTRODUCCIÓN
La tinción de Gram es una técnica diferencial comúnmente empleada en el diagnóstico microbiológico, fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. La mayorparte de las muestras sometidas a examen cuando se sospecha infección bacteriana deben ser extendidas en frotis sobre laminillas de vidrio, teñidas y examinadas en el microscopio. Los reactivosempleados en la tinción de Gram son el cristal violeta (colorante básico), lugol (mordiente), alcohol cetona (decolorante) y safranina (colorante de contraste).
El cristal violeta sirve como colorantebásico uniéndose a la pared celular bacteriana, con ayuda del mordiente (lugol) quiere fuerza la unión del colorante. Las bacterias Gram positivas, debidas a la estructura y composición bioquímica de supared celular retienen el complejo cristal violeta-lugol y aun después del tratamiento con el decolorante conserva el colorante básico, por lo que se observan de color púrpura o violeta al microscopio.Las bacterias Gram negativas pierden el colorante básico cuando son tratadas con el decolorante debido a que el alcohol disuelve el contenido lipídico de la pared celular (lo que aumenta lapermeabilidad celular), dando como resultado la pérdida del complejo cristal violeta-lugol. Las bacterias decoloradas captan entonces el colorante de contraste, razón por la cual estas bacterias se observan decolor rojo al microscopio.






Objetivo:
Identificar la morfología (coco, bacilo, etc.) y tipo de tinción (Gram positiva o Gram negativa) de las cepas proporcionadas.
Material por equipo:Microscopio óptico Materiales
•Mechero de Bunsen
•Asa bacteriológica
•Portaobjetos
•Varillas de vidrio (soporte)
•Pizeta
•Gasas Reactivos:
•Cristal violeta
•Solución de lugol Muestra:Proporcionada
•Alcohol acetona por el profesor (a).
•Safranina
•Aceite de inmersión


Procedimiento:
Limpiar el portaobjetos con gasas y encender el mechero. Colocar una gota de solución...