tincion pap

tinción de papanicolau
La tinción de Papanicolaou es un método de tinción policrómico que consta de una tinción nuclear y un contraste citoplásmicos. Tiene como ventaja una buena definición deldetalle nuclear, evidenciando el patrón de cromatina; un aspecto transparente del citoplasma, que permite apreciar los grados de diferenciación celular y actividad metabólica. La tinción de Papanicolaouutiliza tres colorantes: la Hematoxilina que tiñe selectivamente los núcleos, el Orange G y la Eosina Alcohol 50 que tiñe los citoplasmas. Los pasos de la tinción están entremezclados con soluciones quehidratan, deshidratan y enjuagan las células. La hidratación antes de la inmerción en Hematoxilina puede ser gradual, usando alcohol en concentraciones decrecientes (80, 70, 50%) o abrupta,sumergiendo el material celular desde altas concentraciones de alcohol y al agua directamente. El enjuague se realizara con agua corriente y/o agua destilada, pero siempre hay que verificar que el pH del aguase encuentre entre 6.5 y 7.La tinción de Papanicolaou tiene cuatro pasos principales:
a. Fijación.
b. Tinción del núcleo con Hematoxilina.
c. Tinción de citoplasma con Orange G y EA.
d.Aclaramiento.
Tinción del núcleo
La Hematoxilina es un colorante natural que tiene afinidad por la cromatina. Existen dos métodos para teñir el núcleo, el progresivo y el regresivo. En el método progresivo setiñe el núcleo con la intensidad del color deseada y en el regresivo se sobretiñe con una Hematoxilina no acidi-ficada, luego se remueve el exceso de tinción con ácido clorhídrico diluido. Después dealgunos minutos en Hematoxilina las células son deshidratadas gradual o abruptamente antes de efectuar las tinciones de contraste.
Tinción del citoplasma
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Tinción de Papanicolaou
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