Tincion

Indice

Introducción

Esterilizacion de material cristalino

Medios de cultivo y vaciador de agar

Conteo de bacterias coliformes

Tincion diferencial de Gram

ESTERILIZACION DE MATERIAL CRISTALINO
Introducción:
Esterilización es el proceso mediante el cual se alcanza la muerte de todas las formas de vida microbianas, incluyendo bacterias y sus formas esporuladas altamenteresistentes, hongos y sus esporas y virus. Se entiende por muerte, la perdida irreversible de la capacidad reproductiva del microorganismo. (Vignoli Rafael 2002).
Los procesos de esterilización y/o de infección son diariamente llevados a cabo, no solamente en el laboratorio, donde son fundamentales para evitar la contaminación de medios, cultivos, placas etc. Si no también en otros ámbitos tales comohospitales, donde fallas en estos procedimientos aumenta la morbimortalidad de los pacientes (Vignoli Rafael 2002).
Los métodos de esterilización comprenden entonces, todos los procedimientos físicos, mecánicos y químicos que se emplean para destruir gérmenes patógenos.
Los más utilizados en la actualidad son los métodos físicos (calor, radiaciones, filtración, centrifugación) y los métodosquímicos (agente químico) 
 Calor Húmedo: La utilización del calor y su eficacia depende de dos factores: el tiempo de exposición y la temperatura. Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la acción del calor. El calor provoca desnaturalización de proteínas, fusión y desorganización de las membranas y/o procesos oxidantes irreversibles en los microorganismos. El calor húmedoproduce desnaturalización y coagulación de proteínas. Estos efectos se deben principalmente a dos razones:  1) El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua y 2) El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire.
 Vapor a presión (autoclave): Se realiza la esterilización por elvapor de agua a presión. El modelo más usado es el de Chamberland.  Esteriliza a 120º a una atmósfera de presión (estas condiciones pueden variar) y se deja el material durante 20 a 30 minutos. El vapor a presión proporciona temperaturas altas con penetración y humedad en abundancia que facilitan la coagulación de las proteínas.
Calor Seco: El calor seco produce desecación de la célula, es estotóxicos por niveles elevados de electrolitos, fusión de membranas. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos.  La acción destructiva del calor sobre proteínas y lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está seco o la actividad de agua del medio es baja.
 Entre los métodos que utilizan el calor secocomo medio de esterilización se destacan: el flameado este consiste en la exposición del instrumento a una flamaen forma directa por poco tiempo con el mechero de Bunsen.
El autoclave es un instrumento de laboratorio que es útil para la esterilización de cualquier material de cristalería o ya sea para la eliminación de microorganismos en medios de cultivo y materiales.

OBJETIVO:Esterilizar los materiales de cristalería por el proceso de calor húmedo (Autoclave).

MATERIALES:
* 2 Pipetas graduadas de 1 y 10.
* 4 cajas petri.
* Matraz erlenmeyer.

SUSTANCIAS:
* Agar.
* Agua destilada.

MATERIAL DE APOYO:
* Autoclave.
* Papel destraza.
* Cinta adhesiva.
* Mesa de laboratorio.
* Jabón.
* Franela.
* Vaso de precipitado.
*Probeta graduada.

DESARROLLO:

1.- Lavar el material con jabón antibacterial.
2.- Secar el material.
3.- Una vez secado el material envolver las cajas petri y las pipetas con papel destraza.
4.- Preparar el medio de agar haciendo una regla de 3 para saber cuántos gramos se utilizan.
23.5 gr ---------- 1000ml
Gr ------------ 200ml
Gr=23.5gr (200ml) = 4700/1000ml = 4.7 gr...