Urocultivo 1

1. UROCULTIVO PROCEDIMIENTO PARA LOGRAR UNA BUENA IDENTIFICACIÓN
2. INTRODUCCIÓN Las infecciones del tracto urinario son frecuentes en la población, principalmente entre las mujeres debido a la corta distancia ano-vagina y la corta longitud de la uretra. Estas infecciones son causadas generalmente por agentes bacterianos, los cuales pueden ser encontrados en la orina. El Urocultivo es el métodoque se utiliza para la identificación de estos agentes etiológicos y para evaluar su sensibilidad/resistencia frente a antibióticos
3. CLÍNICA • Cistitis • Disuria, tenesmo vesical, orina de mal olor • Pielonefritis • Síntomas anteriores que incluyen síntomas sistémicos y dolores lumbares
4. MATERIALES • Muestra de orina obtenida con técnica aséptica • Placas de Agar sangre, Agar Mc-Conkey y AgarMuëller-Hinton • Asa calibrada de platino de 10 µL • Mechero
5. PROCEDIMIENTO • Esterilizar el asa calibrada de 10 µL en el mechero y luego enfriarla introduciéndola en la orina • Agitar con la misma asa la muestra de orina y tomar una cantidad para el sembrado
6. ASA CALIBRADA Asa calibrada de 10 µL, permite sembrar las colonias bacterianas y obtener un crecimiento que se puede cuantificar, eneste caso 1 colonia equivale a 100 Unidades Formadoras de Colonias por mL
7. PROCEDIMIENTO • Sembrar la muestra de orina en las lacas de Agar sangre Agar MCConkey • Para esto, realizar una estria con el asa sobre el diámetro de la placa y luego pasar el asa perpendicularmente a esta línea, cubriendo el resto del campo
8. UROCULTIVO • En el Urocultivo se utiliza el agar sangre el cual es un medioenriquecido que permite el desarrollo de múltiples tipos de bacterias incluyendo las que producen infecciones del tracto urinario
9. PROCEDIMIENTO • Una vez sembrados ambas placas, se incuban a 37 °C durante 18 horas • A partir de la cantidad de colonia que crecieron se establece el número de Unidades formadoras de colonias que en este caso por utilizar una asa calibrada de 10 µL cada coloniaequivale a 100 UFC/mL
10. AGENTES ETIOLÓGICOS MÁS FRECUENTES • Escherichia coli • Klebsiella spp • Proteus spp • Pseudomona spp • Enterobacter spp • Citrobacter spp • Staphylococcus aureus • Acinetobacter sp
11. PRUEBAS ADICIONAL • Pruebas Bioquímicas • La prueba de Citrato permite evaluar si el agente bacteriano es capaz de metabolizar este sustrato. • En un resultado positivo se observa un cambio decolor de verde a azul
12. PRUEBAS ADICIONAL • Pruebas Bioquímicas • La prueba de TSI permite evaluar si el agente bacteriano es capaz de fermentar tres tipos de azucares, observandose un cambio de color de amarillo a rojo (o negro) cuando es un resultado positivo
13. PRUEBAS ADICIONAL • Medios especiales • Cromoagar, permite la identificación del agente patógeno solo con sembralo en la placa eincubarlo, ya que posee enzimas específicas para cada bacteria que produce un color de acuerdo a la bacteria de la que se trate
14. ESTUDIOS DE SUSCEPTIBILIDAD A ANTIBIÓTICOS Antibiograma • Luego de identificar al agente etiológico causante de la infección se realiza el antibiograma • Se toma una de las colonias aisladas en las placas anteriores con un asa normal y se siembra en una placa de AgarMuëller-Hinton • El sembrado de debe realizar en tres direcciones cubriendo la totalidad del campo de la placa
15. ESTUDIOS DE SUSCEPTIBILIDAD A ANTIBIÓTICOS • Luego se posan sobre la placa sembrada los sensidiscos impregnados con los antibióticos separados a una distancia razonable • Luego se incuaba la placa a 37 °C por 18 horas • Finalmente de miden los halo de inhibición alrededor de los discos y secompara con las tablas estandarizadas para evaluar y el agente es sensible o resistente al antibiótico
16. ANTIBIOGRAMA El antibiograma además de evaluar la susceptibilidad frente a antibióticos, también puede hacer sospechar de algunos agentes bacterianos, como es el caso de la Pseudomona aeruginosa la cual produce un pigmento verde sobre el Agar Muëller-Hinton (foto derecha).
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