Las Bilirrubinas

BILIRRUBINAS

BILIRRUBINA
La bilirrubina que es el resultado de la degradación de la hemoglobina en los glóbulos rojos es el resultado de la hemólisis (destrucción de los eritrocitos). Es producida por el sistema retículoendotelial y es eliminado por el hígado, que la excreta hacia la bilis. Es la sustancia que pigmenta la bilis.

Existen dos tipos de bilirrubina en el organismo:
Labilirrubina indirecta o no conjugada: (que está unida a las proteínas y la bilirrubina directa o conjugada que circula libremente en la sangre hasta que llega al hígado, donde se conjuga con la glucuroniltransferasa y posteriormente es excretada en la bilis.
Se le llama bilirrubina total a la suma de estas dos bilirrubinas, hablando de la determinación de esta en sangre.

METABOLISMO DE LASBILIRRUBINAS

* Producción de bilirrubina.
Los eritrocitos que ya han cumplido su periodo de vida son fagocitados por los macrófagos y destruidos, dando así lugar a la liberación de la hemoglobina, la cual por la intervención de la hemooxigenasa se tranforma en biliverdina. Posteriormente la biliverdina con ayuda de la biliverdinareductasa se convierte en bilirrubina.

* Transporteplasmático.
Esta bilirrubina es llamada libre, no conjugada o indirecta. Debido a que es liposoluble va a circular en el plasma unida a la albúmina, lo que impide su paso a los tejidos.

* Captación hepática.
Por medio del endotelio de sinusoide el complejo bilirrubina-albúmina va a pasar al espacio de Disse, siendo captado por la membrana del hepatocito. Una vez en el interior delhepatocito, la bilirrubina se une a proteínas citoplasmáticas y es transportada al retículo endoplasmático

* Conjugación.
En el retículo endoplasmático del hepatocito, la bilirrubina es conjugada con el ácido glucurónico mediante la uridin-difosfato-glucuronil-transferasa (UDPG-transferasa), dando lugar a mono y, sobre todo, diglucurónidos de bilirrubina. Mediante este proceso de conjugación, labilirrubina libre pierde sus efectos tóxicos sobre el organismo y en este momento se le conoce ya como bilirrubina conjugada o directa.

* Excreción.
La bilirrubina conjugada es excretada a través de la membrana del hepatocito al canalículo biliar. Con la bilis, llega hasta el duodeno a través del árbol biliar.

La bilirrubina conjugada es hidrosoluble y, por tanto, puede eliminarse por laorina.

* Circulación entero hepática.
En el íleon terminal y en el colon, la bilirrubina conjugada es hidrolizada por la beta-glucuronidasa de las bacterias intestinales, es entonces reducida a estercobilinógeno y urobilinógeno. El 80% de esto es oxidado a estercobilina y urobilina y es eliminado en las heces. Del 20% restante es reabsorbido (circulación enterohepática), y de este 20% el 90%es reexcretado por el hígado y el 10% se elimina por la orina.


TÉCNICA/DETERMINACIÓN DE BILIRRUBINAS
Hay un reactivo (diazo-reactivo) que cuando se pone en contacto con la bilirrubina se produce un cambio de coloración, que se puede medir con un espectofotómetro, para determinar la cantidad exacta de bilirrubina que se está midiendo. Este reactivo mide la bilirrubina conjugada o directa(porque reacciona directamente con el reactivo). Si al plasma se le agrega un solvente orgánico, se produce una mayor cantidad de bilirrubina, que estaba “escondida”. Esta es la bilirrubina no conjugada o indirecta (porque no reacciona en primera instancia con el reactivo). La suma de ambas bilirrubinas (directa + indirecta) es la bilirrubina total.

Material:
* Espectrofotómetro ofotocolorímetro.
* Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes indicados.
* Celdillas.
* Cronómetro.
* Desarrollador: solución acuosa de benzoato de cafeína 0,13mol/l, tamponada y estabilizada.
* Nitrito de Sodio: solución de nitrito de sodio 0,07 mol/l.
* Reactivo Sulfanílico: solución de ácido sulfanílico 29 mmol/l y ácido clorhídrico 0,17 mol/I.
* Diazorreactivo: de...