practica 4 punto isoelectrico

UNIVERSIDAD JUAREZ DEL ESTADO DE DURANGO
Facultad De Ciencias Químicas

BIOQUIMICA I




Practica 4:
PUNTO ISOELECTRICO DE LAS PROTEINAS



Nombre:
Michelle Silva Ramírez


Grupo: 4° “A”


Profesora: Sara Bandt Favela


Gómez Palacio, 27/04/2015
P R A C T I C A No. 4

PUNTO ISOELECTRICO DE LAS PROTEINAS

OBJETIVO

En este experimento se va a estudiar el cambio de solubilidad que presentanlas proteínas a diferentes pH’s.

FUNDAMENTO

En el punto isoeléctrico la solubilidad está reducida al mínimo. Se va a medir el pH isoeléctrico de la caseína notando en cuál de los tubos que la contienen junto con soluciones amortiguadoras de ácido-acético-acetato sódico de diversos pH’s es menor de su solubilidad.

INTRODUCCION

Las proteínas son polímeros gigantes constituidos por polipéptidosformados a su vez por muchas unidades diferentes de aminoácidos. Existen algunos aminoácidos que le confieren a las proteínas cargas eléctricas positivas (NH+3) o bien carga eléctrica negativa (COO-). Cuando las proteínas
se encuentran en su especie de ión Zwitterión su carga eléctrica neta es nula o igual a cero. El valor del pH en el que sucede este tipo de evento se le conoce como puntoisoeléctrico de las proteínas.
Aunque la mayoría de los grupos carboxílicos y los grupos amínicos de los aminoácidos se desbloquean cuando estos se unen para formar las uniones peptídicas, siempre quedan libres algunos de estos grupos, ya sea en los extremos de las cadenas polipeptidicas, o en las cadenas laterales de los aminoácidos acidícos y básicos. La disociación de los grupos ionizables queestán presentes en las proteínas, ocurre como en el caso de los grupos ionizables de los aminoacidos individuales, y es gobernada por el pH del medio en que se encuentra la proteína. A pH 7.0 o en valores cercanos a esta condición, que son los habituales en la mayoría de las células, los grupos carboxilo de los ácidos aspártico y glutámico se encuentran en sus formas básicas cargadas negativamente,mientras que en los aminoácidos lisina y arginina están precentes en sus formas acidícas, cargadas positivamente.
El aminoácido histidina aparece en su mayor parte sin carga y solo cerca de un 10% del total de este aminoácido se encuentra protonado con carga positiva.
La contribución de los grupos sulfhídrico de la cisteína, y fenólico de la tirosina, es minima; por ejemplo, el grupo fenólico de latirosina se encuentra ionisado en 0.1%. la carga total de la molécula proteica depende pues, del pH de la solución es tal que la carga neta de la molecula proteica es ero, es decir, cuando el número total de cargas negativas iguala al numero total de cargas positivas presentes en la molécula, se llama a este valor de pH, punto isoeléctrico o pH isoeléctrico de la proteína.
En la siguiente tabla seencuentran algunos valores del punto isoeléctrico de algunas proteínas:

Proteína
Punto isoeléctrico
Pepsina
1.0
Albumina
4.7
Lactoglobulina
5.1
Hemoglobina
6.7
Quimotripsina
8.3
Ribonucleasa
9.5
Citocromo C
10.7

Todas las macromoléculas de la naturaleza adquieren una carga cuando se dispersan en agua. Una característica de las proteínas y otros biopolímeros es que la carga total que adquierendepende del pH del medio. Así, todas las proteínas tienen una carga neta dependiendo del pH del medio en el que se encuentren y de los aminoácidos que la componen, así como de las cargas de cualquier ligando que se encuentre unido a la proteína de forma covalente (irreversible). Debido a la composición en aminoácidos de la proteína, los radicales libres pueden existir en tres formas dependiendo delpH del medio: catiónicos, neutros y aniónicos.
Cualquier proteína tendría una carga neta positiva si se encuentra en un medio lo suficientemente ácido debido a que los grupos COOH de los aminoácidos aspártico y glutámico estarían en su forma neutra pero los grupos amino de Arginina y lysina estarían protonados (-NH3 + ). De igual forma si la proteína se encuentra en un medio con un pH muy alto...