Ácidos nucleicos

Ácidos nucleídos
Obtención de DNA de Bazo
Experimento 1





Experimento 2 CARACTERIZACIÓN Y ANÁLISIS CUANTITATIVO DEL DNA

Experimento 3 CARACTERIZACIÓN Y ANÁLISIS CUANTITATIVO DEL RNA

Experimento 4 DETERMINACIÓN DELFOSFATO TOTAL

Reactivo Tubo
1 2 3 4 5 6
Buffer de acetato 0.1M pH 4.0 mL 7 7 7 7 7 7
Reactivo molibdato al 2.5% mL 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Solución de vitamina C al 1% reciente mL 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Agua destilada mL 2
Solución tipo 1 M/mL 2
Solución tipo 2.5 M/mL 2
Solución tipo 5 M/mL 2
Problema DNA 2
Problema RNA 2

ÁCIDOS NUCLÉICOS

E
l controlestricto y coordinado de todos los procesos vitales depende de proteínas específicas, fundamentalmente enzimas. Estas dirigen la bioenergética, el transporte a través de membranas, la formación de nuevas células, la diferenciación celular y la creación de nuevos seres. Sin embargo, las moléculas que poseen la información necesaria para la biosíntesis de proteínas son los ácidos nucléicos: ribonucléico(RNA) y desoxirribonucléico (DNA) Además, algunos RNA pueden funcionar como catalizadores.
En 1871 Friedrich Miescher logró aislar del núcleo celular una sustancia que llamó nucleína, la cual debido a su carácter ácido se denominó posteriormente ácido nucléico. El DNA se encuentra en el núcleo y sin abandonarlo, puede transmitir su información por medio del ácido ribonucléico mensajero (RNAm)hasta el ribosoma, constituido por el ácido ribonucléico ribosomal (RNAr), al cual es transportado el material para la síntesis de proteínas por medio del ácido ribonucléico de transferencia (RNAt). RNAm tiene un peso molecular de 300,000. El RNAr constituye el ribosoma y su peso molecular es de 2,000,000. El RNAt tiene un peso molecular de 25,000 a 30,000, mientras que el DNA es una de lasbiomoléculas más grandes que se conocen hasta ahora y su peso molecular va de 1,000,000 a 1,000,000,000 (uno a mil millones).
Tanto el DNA como el RNA se encuentran asociados con proteínas fuertemente básicas (histonas o protaminas) formando las llamadas nucleoproteínas.
• Los ácidos nucléicos están constituidos por bases púricas, bases pirimídicas, pentosa y ácido fosfórico.
• El DNA tiene como basespúricas adenina y guanina, como bases pirimídicas, citosina y timina, como pentosa la 2-desoxirribosa y ácido fosfórico H3PO4.

• Los ácidos ribonucléicos tienen como bases púricas: adenina y guanina y como bases pirimídicas: citosina y uracilo, como pentosa la D – ribosa y H3PO4.

Los ácidos nucléicos son macromoléculas formadas por la unión de varios nucleótidos. Un nucleótido se puedeconsiderar como un éster fosfórico de un nucleósido, que es la unión de una base púrica o pirimídica con una pentosa. Los mononucleótidos se unen entre sí por medio de un enlace fosfodiester 3’- 5’, formando los polinucleótidos.

OBTENCIÓN DEL DNA DE BAZO

Cuando se desea purificar una sustancia se deben seleccionar las células o tejidos que se van a utilizar como materia prima. En el caso del DNAesta selección es en especial importante porque el contenido de DNA es pequeño en la mayor parte de las células. La célula ideal será aquella que tenga una relación núcleo/citoplasma alta, como en los linfocitos y células del tumor ascítico de Ehrlich. Sin embargo, no es fácil obtener este tipo de células por lo que frecuentemente se usan órganos típicamente linfoides como el timo y el bazo.
Elprimer paso en la extracción del DNA es la homogeneización del tejido. Este paso puede degradar en parte la molécula del DNA si no se toman las precauciones necesarias, la solución reguladora es de citrato 0.01M y NaCl 0.14M, a pH de 7.2 a 7.4; la fuerza iónica de esta solución hace insoluble a la desoxirribonucleoproteína. Si se centrifuga este homogeneizado, en el residuo quedarán los restos...