Análisis Microbiológico

FUNDAMENTOS PRACTICOS PARA EL ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO




TECNICA MICROBIOLOGICA


1. Lavado y preparación del material,
2. Esterilización,
3. Preparación de medios de cultivo,
4. Toma de muestras,
5. Siembra de las muestras,
6. Incubación,
7. Lectura de medios de cultivo,
8. Coloraciones,
9. Pruebas bioquímicas,
10. Identificación,
11. Informe de resultados.


EQUIPO YMATERIAL BASICO PARA UN LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA:


1. Cabinas de seguridad: para la siembra de muestras y minimizar en lo posible la contaminación como consecuencia de la manipulación de las muestras (Ej. Formación de aerosoles)
2. Estufa de cultivo o incubador: equipado con control de la temperatura y diseñado de tal manera que la temperatura sea uniforme en todo su interior y que suvariación no sea mayor a 0,5 ºC del valor consignado. Además debe estar provista de termómetros exactos. Sirven para conseguir unas condiciones óptimas de temperatura y permitir el crecimiento de microorganismos.
3. Heladeras y freezer: sirven para preservar las muestras cuando no se procesan inmediatamente al llegar al Laboratorio.
4. Estufas de esterilización: equipadas con un buen regulador detemperatura que permita controlar temperaturas entre 100 y 180 ºC y contar además con un termómetro o medidor electrónico de temperatura exacto.
La estufa debe ser lo suficientemente espaciosa y en lo posible con circulación de aire.
5. Autoclave: equipada con manómetro y termómetro exacto. La operación del autoclave debe estar de acuerdo a las instrucciones del fabricante. La temperatura deesterilización o la presión deben lograrse como máximo en 30 minutos.
6. Baños termostatizados de agua con agitador: provistos de un buen termostato que permita una temperatura uniforme de 44 0,5 ºC. Debe tener suficiente profundidad para que el tubo de ensayo quede sumergido hasta el nivel del medio de cultivo y poseer además gradillas de acero inoxidable y calefacción eléctrica.
7. Contador decolonias: no siempre necesario.
8. Peachímetro: para la determinación del pH con una variación menor de 0,1 unidad de pH.
9. Balanza analítica: con una precisión de 0,001 g y una capacidad de pesada de 150 g.
10. Balanza granataria: con una precisión de 0,1 g y una capacidad máxima de 1.500 g.
11. Destilador de agua: capaz de producir agua libre de sustancias que puedan inhibir el crecimiento delos microorganismos.
12. Stomacher u homogenizador de muestras.
13. Pipetas: de 10, 5, 1, 0,1 ml.
14. Erlenmeyers: de varias capacidades.
15. Cajas de Petri: de 90 mm de diámetro por 15 mm de altura y de 60 mm de diámetro en vidrio tipo Pyrex o bien de plástico desechables.
16. Tubos de ensayo: de distintas medidas, de ser posible con tapón.
17. Campanitas de Durham.
18. Gradillasmetálicas: de preferencia de acero inoxidable.
19. Ansas y porta-ansa: de Nichrome o mejor platino-iridio, con un lazo de aproximadamente 3 mm de diámetro. Nos permiten tomar la muestra y realizar la extensión en el medio de cultivo. Pueden ser redondas (al cargarla se forma, por capilaridad, una película en el asa) o pueden ser rectas. Estas últimas sirven para llevar a cabo el método de siembra enpicadura que sirve para estudiar la movilidad de las bacterias.
20. Mecheros: de distinto tipo, pero en especial los de tipo Mecker.
21. Frascos de muestreo: en vidrio resistentes, de boca ancha y con tapón esmerilado o tapa a rosca autoclavables y una capacidad aproximada de 200 a 500 ml o bien recipientes esterilizados y desechables.
22. Unidades de filtración: equipo de extracción de vació, enacero inoxidable o de plásticos resistentes a altas temperaturas, para poder someterlas a esterilización.
23. Membranas de filtración: reticuladas, 0,22µm y 0,45µm.
24. Microscopio.
25. Pinzas: de extremos redondeados.
26. Material general de laboratorio: vasos de precipitados, balones, embudos, soportes, etc.

1. ESTERILIZACIÓN:
Todo el material de vidrio empleado en microbiología debe...