Bioingeniería

ITSON
Bioingeniería
[investigación]








Integrantes.
Rodrigo Díaz Gastélum
Jesús Alfredo Beltrán
Yuri Medina Uriarte






PRINCIPALES MÉTODOS ANALÍTICOS DE EVALUACIÓN O MEDICIÓN DEL CRECIMIENTO MICROBIANO
Conteo microscópico directo
Es una técnica común, rápida y barata que utiliza un equipamiento fácilmente disponible en un laboratorio de microbiología, ya queconsiste en contar con un microscopio la cantidad de células presentes en un volumen determinado.
Para estos recuentos se utilizan generalmente cámaras de recuentos ( cámara de Petroff Hauser, cámara de Neubaver – Fig. 5-). Una de las mayores ventajas del recuento microscópico es brindar información adicional sobre el tamaño y la morfología de los objetos contados
La muestra puede utilizarse talcual, (leche, o cultivos puros en medio líquido), o puede prepararse una dilución.
Contando el número de bacterias presentes en los cuadrados (o algunos de ellos) se puede conocer cuánto hay en volumen conocido.( Madigan. 1993.)


Conteo de células viables

El método se basa en la consideración que el crecimiento implica el aumento de los microorganismos capaces de formar colonias.
Este métodopuede hacerse con medios sólidos o líquidos. El método más frecuentemente empleado es el conteo en placas (medios sólidos) formando colonias. Por lo tanto se determinan por este método sólo las células microbianas VIABLES en las condiciones de trabajo (nutrientes, atmósfera, temperatura).
Para ello se siembra una cantidad conocida de la suspensión bacteriana cuyo número se desea conocer.
En unmedio sólido cada bacteria se multiplicará formando una colonia visible a simple vista que puede ser contada.


Como las colonias pueden originarse tanto de una célula como de un grupo de células, se utiliza el término: UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (u.f.c.), y esto puede constituir una desventaja ya que si dos bacterias no se separan darán una sola colonia, subestimando de esta forma elnúmero de microorganismos en la suspensión. Además, a los efectos de que todas las células que queden en una placa tengan una adecuada disponibilidad de nutrientes, y que los errores del método sean menores, se establece que las condiciones óptimas de conteo se dan cuando desarrollan entre 30 y 300 colonias. .( Madigan. 1993.)


Medición de la densidad bacteriana

Es una técnica en la que se midela masa de microorganismos en una suspensión. Para ello se utiliza un espectrofotómetro y se mide la cantidad de luz que atraviesa en una suspensión de microorganismos, en comparación con un blanco que es el medio esterilizado y sin sembrar. Cuanto mayor es el número de células en suspensión, tanto menor es el porcentaje de luz que atraviesa el medio.
Para relacionar la transmitancia con aldensidad bacteriana se requiere de hacer curvas patrón de densidad conocidas. .( Madigan. 1993.)




OTROS MÉTODOS DE RECUENTO

- Determinación de ATP
- Recuento electrónico


PRINCIPALES MÉTODOS ANALÍTICOS DE EVALUACIÓN O MEDICIÓN DE PRODUCTOS O METABOLITOS DE UN PROCESO BIOTECNOLÓGICO
PRINCIPALES MÉTODOS DE CONSERVACIÓN CELULAR
A.- Métodos de elección o de conservación a largo plazo.Son los mejores porque en ellos se paraliza el crecimiento de las células microbianas, pero éstas no han muerto. Así se garantiza al máximo la estabilidad genética, por evitarse la aparición de generaciones sucesivas. (garcia,fernandez)
a).Conservación por congelación.
Se congelan las células en suspensión en un líquido con un agente crioprotector y se guardan a temperaturas inferiores a cerogrados centígrados, con lo que el agua se congela. De esta forma, al no disponer las células de agua en forma líquida, no hay crecimiento. Cuando se quiere trabajar con las células así conservadas, se recuperan subiendo la temperatura.
Los cuatro factores que influyen en la viabilidad y estabilidad de las células conservadas por este método son los siguientes:
1º.- Edad de las células.
2º.-...