biotecnologia vegetal

Manual de laboratorio de Biotecnología
NORMAS DE SEGURIDAD PARA LA UTILIZACIÓN DEL ESPACIO EN
PRÁCTICAS DE LABORATORIO
*Use bata de laboratorio para cada práctica y no utilice calzado destapado
*Use guantes, tapaboca, lentes de protección, y máscara con filtros, cuando se requieran.
*No pipetee con la boca, use un pipeteador
*No se lleve los dedos a la boca, ojos o nariz, ni respiredirectamente sobre ningún reactivo pues sus vapores pueden ser tóxicos.
*No ingiera alimentos o bebidas en el laboratorio
*No use durante las prácticas anillos, cadenas, prendedores, pulseras o collares
*No deposite alimentos en las neveras, ni consuma el hielo que allí se produce
*No se admiten en el laboratorio personas que no estén matriculadas en el respectivo curso, por favor no recibavisitas.
*No ubique bolsos, tulas, maletines o paquetes, en los lugares de trabajo.
UTILIZACIÓN DE REACTIVOS
*Todo reactivo preparado debe rotularse con el nombre del reactivo, la persona que lo preparó y la fecha de preparación
*No arroje por los sumideros ácidos, bases o algún otro reactivo, por favor deposítelos en los recipientes de desecho
*Evite derrames de sustancias en las mesasde trabajo, así se previene que algún compañero se queme la piel o se deteriore la ropa.
*No arroje al piso ningún reactivo
*No arroje al piso papeles u otros elementos. Por favor utilice el recipiente para la basura.



Práctica N. 1:
CULTIVO DE CÉLULAS Y TEJIDOS VEGETALES
INTRODUCCIÓN
El cultivo in vitro, micropropagación o propagación vegetal in vitro, es el cultivo de células,tejidos u órganos de plantas en un medio aséptico que le aporta los nutrientes necesarios para su desarrollo. En este medio y con algunas condiciones físicas y químicas apropiadas, las células tienen la habilidad de desarrollarse, desdiferenciarse, producir metabolitos, multiplicarse y hasta regenerar un organismo entero" (Dodds & Roberts, 1985), en cuyo caso, la nueva planta será genéticamenteidéntica a la planta madre, y su desarrollo se dará en un periodo de tiempo mucho mas corto. Así pues, para lograr cualquiera de estos propósitos se debe iniciar con la utilización de pequeñas muestras de tejidos vegetales (explante) que tras una adecuada desinfección superficial, son transferidos asépticamente a medios nutritivos líquidos o semisólidos y almacenados bajo condiciones ideales detemperatura y fotoperíodicidad que garanticen un rápido desarrollo.
Los medios de cultivo, líquidos o semisólidos, difieren básicamente por la presencia de un gelificante, contienen carbohidratos como fuente de carbono y energía (generalmente sacarosa), sumado a minerales, vitaminas, aminoácidos, suplementos orgánicos y en muchos casos fitohormonas o compuestos sintéticos conocidos como reguladoresde crecimiento, son mensajeros químicos vegetales secretados en un determinado tejido y que actúan en el mismo tejido, o en otro distinto de la planta y por ello, se les considera biocatalizadores junto con los enzimas y las vitaminas. Las hormonas vegetales pertenecen a cinco grupos cada uno de los cuales exhibe propiedades fuertes de regulación del crecimiento en plantas y pueden ser activos amuy bajas concentraciones dentro de la planta, estos grupos son: Auxinas, Citoquininas, Giberelinas, Acido Abscísico y Etileno.
OBJETIVO GENERAL:
Esta práctica pretende que el estudiante conozca e implemente algunas técnicas básicas del cultivo de tejidos vegetales.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
Inducir desdiferenciación tisular en explantos provenientes de diferentes tejidos vegetales. Acelerar elcrecimiento de plantas utilizando medios nutritivos suplementado con fitohormonas.
Conocer la utilidad y el manejo del equipo básico, instrumentos y herramientas de un laboratorio de cultivo de tejidos vegetales.



REACTIVOS Y MATERIALES A EMPLEAR:
Ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), 6-benzilaminopurina (BA), hipoclorito de sodio, alcohol industrial, etanol, agar, sacarosa,...