Caldos De Cultivo

Núcleos temáticos: Medios de cultivo. Clasificación y composición. Líquidos de dilución. Esterilización.

Introducción teórica.
Para el estudio de los microorganismos es necesario cultivarlos en condiciones de laboratorio. Para ello hay que conocer los nutrientes y condiciones físicas que requieren, información que disponemos tras investigaciones extensas y con las que se handesarrollado numerosos medios de cultivo.

Definición de medio de cultivo
Substrato óptimo para el mantenimiento y crecimiento de microorganismos en el laboratorio. El medio variará dependiendo del tipo de microorganismo.
Un cultivo que contiene solamente una clase de microorganismo se conoce como cultivo puro o axénico. Un cultivo que contiene más de una clase de microorganismo se conocecomo cultivo mixto; en el caso especial de que contenga sólo dos clases de microorganismos, deliberadamente mantenidos en mutua asociación, se trata de un cultivo bimembre.

Definición de aislamiento
Es la separación de un microorganismo determinado de las poblaciones mixtas que existen en la naturaleza; el cultivo, es el crecimiento de poblaciones microbianas en ambientes artificiales (medios decultivo) bajo condiciones de laboratorio.

Condiciones generales de un medio de cultivo
• presentar todos los elementos necesarios y en sus proporciones/cantidades necesarias.
• pH adecuado.
• condiciones osmóticas adecuadas.
• debe de ser estéril y preservado de cualquier contaminación.
• medio fresco (ya que se desecan y pierden humedad, concentrándose el resto de componentes).Componentes de los medios de cultivo
• Agua
• Extracto de levadura: fuente rica en vitaminas B; también contiene nitrógeno orgánico y compuestos de carbono.
• Peptonas: es el producto que resulta de la digestión de materiales proteicos. Constituye una fuente principal de nitrógeno orgánico; contiene también algunas vitaminas, y a veces carbohidratos. Distinguimos dos tipos, dependiendo deltipo de digestión que hayan sufrido:
← Hidrólisis química (ácida o alcalina)
← Hidrólisis enzimática
• Infusiones y extractos: contienen las sustancias solubles en agua de tejidos animales (carbohidratos, compuestos orgánicos nitrogenados, vitaminas solubles en agua y sales). Mientras que un caldo se obtiene por ebullición de los tejidos,una infusión implica un "colado" del líquido obtenido. Un extracto es un concentrado de un caldo.
• Azúcares: actuarán como fuente de energía (cuando su proporción es de 1 g/l) o como substrato de prueba (1-2%)
• Sales minerales: podemos distinguir dos tipos, atendiendo a la función que desempeñan.
Estos son:
← Sales para el mantenimiento de la presión osmótica (NaCl).← Tampones: carbonatos y fosfatos (este ultimo más eficaz).
• Indicadores de pH: son sustancias que cambian de color cuando el medio alcanza algún valor determinado de pH. Los más utilizados son:
← Azul de timol (Rojo 1,2 Azul 2,8 Amarillo)
← Púrpura bromocresol (Amarillo 5,2 Anaranjado 6,8 Púrpura)
← Azul de bromotimol (Amarillo 6,0 Verde 7,6 Azul)← Rojo fenol (Amarillo 6,8 Rojo claro 8,4 Rojo cereza)
← Rojo neutro (Rojo intenso 6,8 Rojo 8,0 Amarillo)
← Azul de bromofenol, rojo de metilo, rojo de cresol, fenolftaleina, etc...
• Indicadores REDOX: son sustancias que cambian de color cuando se producen este tipo de reacciones. Distinguimos:
← Azul de metileno (azul-incoloro)
←Cloruro de trifenilo (incoloro-rojo)
• Agentes selectivos: son sustancias que inhiben el crecimiento de determinados microorganismos en detrimento de otros. Encontramos varios tipos:
← Colorantes (antimetabolitos): cristal violeta, verde brillante, etc...
← Azida sódica: inhibe el metabolismo aerobio (inhibe la cadena respiratoria); esto afecta principalmente a...