Caseina

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA 502504 GUIA 2.2-DETERMINACIÓN DEL PUNTO ISOELECTRICO DE LA CASEINA. I. EL PROBLEMA

Determinar el punto isoeléctrico de la caseína. II. FUNDAMENTO TEORICO:

La caseínarepresenta el 80% de las proteínas presentes en la leche y el 2,7% en composición de la leche líquida, hay varios tipos de caseína que son ∇s1, ∇S2,  y ∨; estas proteínas precipitan del líquido cuandoesta toma un pH ácido de 4,6. El pH en el que precipitan las proteínas se denomina punto isoeléctrico (pI), ya que se encuentran en el equilibrio las cargas positivas y negativas presentando unacarga neta de 0 y la proteína presenta su máxima posibilidad para ser precipitada ya que la partículas se agregan. Debido a la composición en aminoácidos de la proteína, los radicales libres puedenexistir en tres formas dependiendo del pH del medio: catiónicos, neutros y aniónicos, y así cada proteína tendrá un pI diferente.

NH3+ HOOC H Catiónico (carga 1+) H - H+ + H+

NH3+
-OOC

NH2 - H+ +H+
-OOC

H

H

H Forma isoeléctrica (carga neta cero (0))

H Aniónico (carga -1)

III.

BÚSQUEDA DE INFORMACIÓN: Consulte la importancia industrial de la caseína ¿Cuál es el pI de lacaseína? Consulte el valor del punto isoeléctrico de tres proteínas de interés.

IV.

MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales por grupo: Nueve tubos de ensayo Dos vasos de precipitados de 50ml Unagradilla para tubos de ensayo Un erlenemyer de 250ml Un erlenmeyer de 150ml probeta de 50ml Dos pipetas graduadas de 5,0ml Dos pipeta graduada de 1,0 ml Dos pipetas graduadas de 10,0ml Dos vasos deprecipitado de 50ml Agitador de vidrio Embudo de vidrio mediano Vidrio de reloj Papel de filtro flujo rápido Dos goteros de plástico

Reactivos por grupo: (volúmenes por grupo de trabajo) Agua destiladaÁcido acético 0,01N Ácido acético 0,1N Ácido acético 1,0N NaOH 1N Éter etílico Etanol al 70%

Materiales y reactivos de uso general: Soluciones buffer pH 4,0 y 7,0 para calibrar el potenciómetro...