cidos y bases TINCIONES
En disolución se cargan negativamente por eso se unen a estructuras cargadas positivamente y no las células, que tienen carga negativa.
Sales de Na. K, Ca, ión amonio, eosina, rojo congo,rosa bengala, fucsina ácida...
Básicos:
En disolución se cargan positivamente uniéndose a estructuras con carga negativa como las células.
Cloruros, sulfatos, azul de metileno, cristal violeta, verdemalaquita, fucsina fenicada o carbol-fucsina...
Tipos de tinciones:
Simples: se usa un solo colorante disuelto en solución acuosa o alcohólica, y se suplementan con un mordiente para una mejorfijación del colorante además de aumentar el grosor de algunas estructuras para su mejor visión. Sirven para ver la morfología y las agrupaciones que forman los microorganismos entre ellos y con otrascélulas.
Diferenciales: Se usa mas de un colorante. Tiñe de diferente modo a las células de distintas especies.
TINCIÓN DE GRAM
Es la más importante en bacteriología. Gracias a ella distinguimos dos tipos debactrias:
Gram +. Son aquellas que se tiñen con cristal violeta (colorante primario)
Gram -. Son aquellas que se tiñen con safranina (colorante secundario)
Protocolo:
1. Frotis
2. Fijación
3.Cristal violeta (2 minutos)
4. Lugol (un minuto). Es un mordiente que aumenta la afinidad de la célula por el colorante anterior.
5. Alcohol 96º o acetona. Decolora la preparación. 45 segundos.
6. Lavar conagua
7. Safranina (un minuto)
8. Lavar con agua, secar y observar
Las gram + aparecerán violetas, y las gram – aparecerán rosas. Las diferencias entre + y – obedecen a la estructura de su paredcelular:
Las gram + tienen una pared muy gruesa que contiene muy pocos lípidos, mientras que las gram – son muy delgadas y contienen gran cantidad de lípidos.
Con el cristal violeta, tanto las + como las– se tiñen de violeta, y con el lugol, retienen el colorante aún más. El alcohol 96º, que es un deshidratante, elimina los lípidos de las células. Las gram + pierden los pocos lípidos que tienen,...
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