LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Docente: Lic. Lineth García
Universitario: Alessandra M. Flores C.
Grupo: Jueves 1030 -1245 (Biología)
Auxiliar: Univ. AlejandroCanaza Jorges
Fecha de entrega: 23/04/10


Práctica # 3
CITOQUÍMICA
1. INTRODUCCIÓN
Es el estudio de la localización de los diferentes constituyentes celulares, susrelaciones estructurales e interacciones. (Dorland, 2006).
El análisis químico revela los constituyentes del protoplasma, nos demuestra el modo de asociación de los componentes químicos paraconstituir la materia viva. Para realizar el análisis químico del protoplasma se trata a la célula con reactivos mortíferos. Tanto los colorantes como los fijadores sino alterna lacomposición global determinan cambios físicos-químicos. (Guachalla, 2005).
En una reacción citoquímica hay tres pasos fundamentales:
1.- Fijación: para preservar las estructurasy reactividad funcional celulares evitando fenómenos nocivos para las mismas e impidiendo también la difusión de componentes bioquímicos entre los diferentes compartimentos celularesasí como al medio extracelular. Existen diversos fijadores: metanol, etanol, acetona, glutaraldehído, formaldehído, etc.
2.- Incubación en el medio de reacción: como consecuenciase liberar unos productos que bien por sí mismos, o al combinarse con otra sustancia presente, dan lugar a un precipitado visible en el lugar de la reacción.
3.- Contraste: pararesaltar en lo posible el producto de reacción y permitir una óptima visualización del núcleo y del citoplasma. ( Woessner, 1990).
Métodos citoquímicos:
-Reacción de Feulgen (conreactivo Schiff): para ADN.
-Reacción de Milon y Sagakuchi: para tirosina y arginina.
-Tetraóxido de Osmio, Sudan III y IV: lípidos.
-Acetona: Enzimas
-Reacción de PAS (reactivo [continua]

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