clonacion

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Martínez Díaz, M A; Gatica, R; Correa, J E; Eyestone, W
Gestaciones producidas con embriones bovinos clonados por transferencia nuclear
Archivos de Medicina Veterinaria, vol. 39, núm. 1, 2007, pp. 59-62
Universidad Austral de Chile
Chile
Disponible en:http://redalyc.uaemex.mx/src/inicio/ArtPdfRed.jsp?iCve=173013330008

Archivos de Medicina Veterinaria
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Arch. Med. Vet. 39, Nº1, 2007

TRANSFERENCIA NUCLEAR, CLONACION, BOVINOS

COMUNICACION

Gestaciones producidas con embriones bovinos clonados por transferencia nuclear#
Pregnancies produced by bovine embryos cloned by nuclear transfer
M A Martínez Díaz1* , R Gatica1, J E Correa1, W Eyestone2
1 Instituto

de Reproducción Animal, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Austral de Chile, Valdivia,Chile.
of Large Animal Clinical Sciences, Virginia-Maryland Regional College of Veterinary Medicine,
Virginia Technology, USA.

2 Department

SUMMARY
With the aim of obtaining pregnancies from nuclear transfer embryos reconstituted with somatic cells and enucleated oocytes, bovine oocytes
from slaughterhouse were matured in vitro and enucleated by micromanipulation. Nuclear donor cells wereobtained from the ear of an adult cow,
cultured for 9 to 14 days and cryopreserved in liquid nitrogen. Confluent cells were inserted individually in the perivitelline space of enucleated
oocytes and treated with 2 electric pulses to induce fusion. The reconstituted zygotes were then cultured for 2 hours and treated with ionomycin and
6-dimethylaminopurine for their activation. The embryos werecultured in synthetic oviduct fluid for 8 to 9 days to obtain the blastocyst stage. These
blastocysts were transferred to recipient heifers 7 to 9 days after oestrus. The ultrasound pregnancy diagnosis was done about 30 days after recipient
oestrus. Five pregnancies were obtained from 25 transfers (20%). Two of them were lost at 42 days and a third at 120 days. This seems to be the first
report onpregnancies obtained by cloned embryos in Chile.
Palabras clave: transferencia nuclear, clonación, bovinos.
Key words: nuclear transfer, cloning, cattle.

INTRODUCCION
La clonación por transferencia nuclear (TN) de células
somáticas es un método más efectivo para producir
animales transgénicos que la técnica de inyección
pronuclear (Hodges y Stice 2003).
La clonación en bovinos puede serutilizada para la
multiplicación de animales de alta productividad, por
ejemplo, la multiplicación de toros con una progenie
probada, o bien, para animales que expresan otras
características productivas altamente deseadas. Otra
alternativa para esta especie es la producción en la leche
de proteínas específicas para uso farmacéutico, los
denominados biorreactores (Brophy y col 2003). Lageneración de bovinos resistentes a enfermedades ofrece
otra posibilidad en producción y sanidad animal. Se ha
reportando obtención de embriones bovinos resistentes a
mastitis (Wall y col 2005) y a encefalopatía espongiforme
bovina (Will Eyestone, comunicación personal).
La TN de células somáticas envuelve varios
procedimientos, todos ellos pueden afectar de forma
substancial la viabilidadembrionaria y fetal. Entre los
factores importantes se pueden señalar, la línea celular

utilizada como donante de núcleos (revisado por Tian y
col 2003), el proceso de transferencia nuclear (fusión o
microinyección (Kurome y col 2003), la coordinación
del ciclo celular entre la célula donante y el ovocito
receptor (Campbell y col 1996) y el tiempo entre la fusión
y la activación inducida...