Colesterol

COLESTEROL
Números de catálogo: 206-15 206-50 Presentaciones: 10 x 15 mL 12 x 50 mL

USO Para la determinación cuantitativa in vitro de colesterol en suero. PRECAUCIONES Evite ingerirlo, inhalar su polvo o el contacto con los ojos o con la piel. En caso de que hubiere contacto alguno con el reactivo, enjuague con agua inmediatamente. REACTIVOS Reactivo para Colesterol Total: una solución(después de reconstituir) que contiene un amortiguador (pH 6.6 a 25°C), 0.26 mmol/L de 4-aminoantipirina, 2780 U/L de peroxidasa, 600 U/L de colesterol esterasa, 200 U/L de colesterol oxidasa, tensoactivos, estabilizadores y conservadores. Estándar para Colesterol Total: 1 x 15 mL de una solución que contiene 5 mmol/L (193 mg/dL) de colesterol, un agente tensoactivo y un conservador. ANTECEDENTES Elcolesterol es un lípido de alto peso molecular que se encuentra exclusivamente en los animales. Es sintetizado principalmente en el hígado e intestino, y es liberado hacia el sistema circulatorio (1). Las concentraciones séricas de colesterol se ven afectadas por diversos factores, incluyendo enfermedades hepáticas y endocrinas, factores hereditarios y la dieta. La hipercolesterolemia estárelacionada con un alto riesgo de desarrollar aterosclerosis y otros trastornos cardiovasculares. Las metodologías para determinar el colesterol han sido revisadas a detalle por Tonks (2) y más recientemente por Zak (3). El método enzimático utilizado en este ensayo es una modificación del descrito en 1974 por Allain y col., (4) y Roschlau y col.(5). PRINCIPIOS Los ésteres de colesterol son hidrolizadospara liberar colesterol a través de la colesterol esterasa (CE). El colesterol libre es entonces oxidado por la colesterol oxidasa (CO) a colest-4-eno-3-ona con la producción simultánea de peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno producido se acopla con la 4-aminoantipirina y con el p-hidroxibenzoato, en presencia de peroxidasa, para producir un cromógeno con absorbancia máxima a 505 nm. Estemétodo se resume en las siguientes reacciones: CE Ésteres de colesterol → Colesterol + ácidos grasos Colesterol + O2 CO → Colest-4-eno-3-ona + H2O2

Peroxidasa 2H2O2 + 4-aminoantipirina + P-hidroxibenzoato → quinoneimina + 4H2O La intensidad del color producido es directamente proporcional a la concentración de colesterol total en la muestra. Colesterol Página 1 de 5

PREPARACION DELREACTIVO Agregue agua desionizada al número requerido de viales de reactivo de acuerdo al volumen señalado en la etiqueta del vial. Deje pasar 5 minutos para su reconstitución y proceda a mezclar suavemente. ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO Los reactivos proporcionados son estables hasta la fecha de caducidad especificada en las etiquetas a 2-8°C. El reactivo reconstituido es estable por30 días a 2-8°C, o 5 días a 18-26°C. INSTRUMENTOS Este reactivo fue optimizado para uso en instrumentos automáticos con uso manual opcional. Puede usarse cualquier analizador con control de temperatura de ± 0.5°C que sea capaz de leer la absorbancia con exactitud, con una sensibilidad de 0.001 de absorbancia a 505 nm. El ancho de banda deberá ser de 10 nm o menos, la desviación de la luz de 0.5%o menos y la exactitud de longitud de onda dentro de 2 nm. RECOLECCION Y PREPARACION DE LA MUESTRA La muestra de elección es suero fresco, claro y no hemolizado. Las muestras deberán ser tomadas a la mañana siguiente después de un ayuno de 12 horas. Las muestra para el ensayo de colesterol son estables durante una semana a 2-8°C, y por 4 semanas a una temperatura de -20°C a 0°C INTERFERENCIAS Lasinterferencias que ocurren al medir el colesterol usando procedimientos de colesterol oxidasa han sido estudiados por Pesce y Bodourian. (5) Puede consultar un resumen de la influencia de drogas en pruebas de laboratorios clínicos consultando a Young, D.S. (7). PROCEDIMIENTO Materiales Proporcionados Se incluye el reactivo necesario para la determinación de colesterol. Materiales Requeridos 1....