Cresimiento microbiano

Introducción
La levadura Saccharomyces cerevisiae es un organismo no patógeno de fácil cultivo y que pede mantenerse en estado haploide o diploide (Quezada, 2008).
Es un organismo unicelular que pertenece al reino de los hongos. Tiene un pared celular, créese fácilmente en medios nutritivos, es relativamente inmóvil y tiene mitocondrias pero no cloroplastos (Castrejón, 2009), es un anaerobiofacultativo que puede usar como fuente de carbono diversos carbohidratos y compuestos como etanol, acetato o lactato (Quezada, 2008).
Los requisitos para el crecimiento microbiano incluyen factores físicos y químicos. Entre los factores físicos tenemos la temperatura, el pH y la presión osmótica. Los factores químicos necesarios para el crecimiento bacterial son diversos elementos constitutivos delas células.

Figura 1. Levadura S. cerevisiae. Micrografía electrónica de un cultivo de levaduras (Castrejón, 2009).

Cuando se encuentra en su amiente natural, la levadura S. cerevisiae esta sujeta a fluctuaciones en la disponibilidad de nutrientes. Por lo tanto, este microorganismo posee la habilidad de adaptar su metabolismo energético de acuerdo a la naturaleza y a la concentración delos sustratos presentes en el medio. Experimentalmente se ha observado que en presencia de glucosa, S. cerevisiae emplea la glucólisis como su principal vía metabólica (Díaz, 2009).
La especie de levadura predominante en la fermentación alcohólica es S. cerevisiae, que es capas de crecer en diversas fuentes de carbono, pero utiliza preferentemente a la glucosa y muestra la mayor velocidad decrecimiento en este sustrato, mientas que en la fructuosa, obliga a las levaduras a utilizar esta azúcar menos preferido, lo que resulta en una fermentación lenta o incompleta (Segura, 2010).
Problema planteado
¿Qué medio de cultivo (glucosa y/o sacarosa) es más eficaz en el crecimiento de la levadura Saccharomyces Cerevisiae?
Hipótesis
La sacarosa es el mejor medio de cultivo para levadurasSaccharomyces cervisiae ya que está compuesta por dos carbohidratos (fructuosa y glucosa) favorecido el crecimiento de esta.
Materiales y métodos

Material biológico
La levadura Saccharomyces Cerevisiae de la clase Ascomycetes fue proporcionada por el microbiólogo Luis Antonio Hernández González. El inóculo para los cultivos experimentales, principal agente de la fermentación alcohólica, seencuentra en flores y frutos.

Obtención de los sustratos
Los extractos de levadura y demás soluciones para los cultivos de glucosa y sacarosa se obtuvieron por medio de la laboratorista previamente solicitados.

Desarrollo de S. cerevisiae en medios de cultivo Sacarosa y Glucosa
Para determinar las porciones de los sustratos se nos proporcionaron instrucciones, se prepararon 50 ml decultivo de sacarosa y glucosa en un matraz Erlen Meyer de 125ml, colocándolo en 20 tubos de ensayo, en los cuales se inocularon 0.5ml de levadura activa. El crecimiento microbiano se llevo acabo tomando los tubos ya esterilizados, inoculados e incubados en un ambiente adecuado.

Cultivo experimental
Para la escala de Mc Farland se tomo 1ml de H2SO4 con una pipeta de !ml, se coloco en un matrazaforado diluido en 99ml de H2O destilado, pesando también 0.25g de BaCl2 y se diluyo en 25ml de H2O destilada, colocando las soluciones en 4 tubos de ensayo.
Los sustratos se prepararon al 0.2% de extracto de levadura;0.2% de peptona ;0.05% de MgSO4-7H2O; 0.046% de KH2PO4; 2& de glucosa o sacarosa, preparando 50ml en un matraz Erlen Meyer de 125ml, calentándolo con un mechero
Fisher hasta que sedisolvió totalmente, distribuyéndolo en 4 tubos de cultivo con 5ml cada uno se esterilizaron, inocularon con cultivo activado de levadura e incubaron a 30ª C, con excepción de los tubos cero, que se refrigero inmediatamente, posteriormente se tomaba un tubo de cada muestreo y se refrigeraba pasadas 2 horas.
Se utilizó un espectrofotómetro para evaluar el crecimiento de la Saccharomyces...