Electroforesis
| |Laboratorio de Genética|
| |Práctica No. 2|
| |ELECTROFORESIS DE ACIDOS NUCLEICOS.|
OBJETIVO:
El alumno manejará la técnica de electroforesis para poder visualizar correctamente las bandas de ADN que son resultado de una extracción, el producto de una amplificación, ouna restricción con enzimas.
INTRODUCCIÓN:
Investigar: Fundamento de la práctica de electroforesis de ácidos nucleicos.
1.- Preparar 500 ml de TAE (TRIS, ácido acético, EDTA)
Para preparar 1 lt deTAE:
| |TAE 50 X |TAE 1X |
|TRIS |242 g |4.84 g|
|Ac. Acético glacial |57.1 ml |1.14 ml |
|EDTA 0.5 M pH 8.5 |100 ml | 2 ml|
Colocar todos los reactivos en un matraz y aforar al volumen deseado con agua destilada estéril.
2.- Preparar agarosa al 1.5%. Pesar 0.75 g de agarosa y disolver en 50 ml de TAE 1xy después calentar hasta su disolución total, enfriar un poco y añadir 2.5 (l de bromuro de etidio. Vaciar la agarosa en la cámara de electroforesis ya armada con los topes y colocar el peine. Dejarque solidifique revisando que la cámara de electroforesis esté en una superficie bien nivelada.
3.- Una vez que el gel se ha solidificado se retiran con cuidado los topes y posteriormente el...
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